BspQI
BspQI ପୁନର୍ବାର E. coli ରେ ପ୍ରକାଶ କରାଯାଇପାରେ ଯାହା ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ସାଇଟଗୁଡିକୁ ଚିହ୍ନିପାରେ ଏବଂ ତଳେ ଉତ୍ପାଦିତ ହୁଏ |
BspQI, ଏକ IIs ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ଏଣ୍ଡୋନ୍ୟୁକ୍ଲିଜ୍ ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ଏଣ୍ଡୋନ୍ୟୁକ୍ଲିଜ୍, ଏକ ରେକମ୍ବିନାଣ୍ଟ ଇ କୋଲି ଷ୍ଟ୍ରେନ୍ ରୁ ଉତ୍ପନ୍ନ ହୋଇଛି ଯାହାକି ବାକିଲସ୍ ସ୍ପେରେକସ୍ ରୁ କ୍ଲୋନ୍ ହୋଇଥିବା ଏବଂ ପରିବର୍ତ୍ତିତ BspQI ଜିନ୍ ବହନ କରିଥାଏ |ଏହା ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ସାଇଟଗୁଡିକୁ ଚିହ୍ନିପାରେ, ଏବଂ ସ୍ୱୀକୃତି କ୍ରମ ଏବଂ କ୍ଲିଭେଜ୍ ସାଇଟଗୁଡିକ ନିମ୍ନଲିଖିତ ଅଟେ:
5 '· · · · GCTCTTC (N) · · · · · · · · · · 3'
3 '· · · · CGAGAAG (NNNN) · · · · 5'
ଉତ୍ପାଦ ବ Features ଶିଷ୍ଟ୍ୟଗୁଡିକ
1. ଉଚ୍ଚ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ, ଦ୍ରୁତ ହଜମ;
2. ନିମ୍ନ ତାରା କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ, “ସ୍କାଲପେଲ୍” ପରି ସଠିକ୍ କାଟିବା ନିଶ୍ଚିତ କରେ |
3. ବିନା BSA ଏବଂ ପଶୁ-ଉତ୍ପତ୍ତି ମୁକ୍ତ;
ମିଥାଇଲେସନ୍ ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା |
Dମୁଁ ମିଥାଇଲେସନ୍:ସମ୍ବେଦନଶୀଳ ନୁହେଁ;
Dସେମି ମିଥାଇଲେସନ୍:ସମ୍ବେଦନଶୀଳ ନୁହେଁ;
CpG ମିଥାଇଲେସନ୍:ସମ୍ବେଦନଶୀଳ ନୁହେଁ;
ସଂରକ୍ଷଣ ଅବସ୍ଥା
ଉତ୍ପାଦ ≤ 0 be ପଠାଯିବା ଉଚିତ୍;-25 ~ - 15 ℃ ଅବସ୍ଥାରେ ଗଚ୍ଛିତ କରନ୍ତୁ |
ଷ୍ଟୋରେଜ୍ ବଫର୍ |
20mM Tris-HCl, 0.1mM EDTA, 500 mM KCl, 1.0 mM dithiothreitol, 500 µg / ml Recombinant Albumin, 0. 1% Trition X- 100 ଏବଂ 50% glycerol (pH 7.0 @ 25 ° C) |
ୟୁନିଟ୍ ସଂଜ୍ଞା
ଗୋଟିଏ ୟୁନିଟ୍ କୁ 1µg ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ DNA କୁ 1 ଘଣ୍ଟାରେ 50 ° C ରେ ହଜମ କରିବା ପାଇଁ ଆବଶ୍ୟକ ଏନଜାଇମର ପରିମାଣ ଭାବରେ ବ୍ୟାଖ୍ୟା କରାଯାଇଛି ଯାହା ସମୁଦାୟ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପରିମାଣରେ 50 µL ଅଟେ |
ଗୁଣବତ୍ତା ନିୟନ୍ତ୍ରଣ
ପ୍ରୋଟିନ୍ ଶୁଦ୍ଧତା ଅନୁଧ୍ୟାନ (SDS-PAGE):BspQI ର ଶୁଦ୍ଧତା ≥95% SDS-PAGE ବିଶ୍ଳେଷଣ ଦ୍ୱାରା ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରାଯାଇଥିଲା |
RNase:50U ରେ 4 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ 1.6μg MS2 RNA ସହିତ 10U BspQI କ no ଣସି ଅବକ୍ଷୟ କରେ ନାହିଁ ଯେପରି ଆଗରୋଜ୍ ଜେଲ୍ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରେସିସ୍ ଦ୍ determined ାରା ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରାଯାଏ |
ଅଣ-ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ DNase କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ:10U BspQI ର 1μg λ DNA ସହିତ 50 hours 16 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ, 1 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ 50 compared ତୁଳନାରେ, ଅଗରୋଜ୍ ଜେଲ୍ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରେସିସ୍ ଦ୍ determined ାରା ନିର୍ଦ୍ଧାରିତ କ excess ଣସି ଅତିରିକ୍ତ DNA ଉତ୍ପାଦନ କରେ ନାହିଁ |
ମକଦ୍ଦମା ଏବଂ ପୁନ ut ନିର୍ମାଣ:10U BspQI ସହିତ 1 μg λDNA ହଜମ ହେବା ପରେ, DNA ଖଣ୍ଡଗୁଡିକ T4 DNA ଲିଗେଜ୍ ସହିତ 16ºC ରେ ସଂଯୁକ୍ତ ହୋଇପାରେ |ଏବଂ ଏହି ଲିଗେଟେଡ୍ ଖଣ୍ଡଗୁଡିକ BspQI ସହିତ ପୁନ ut ଉଦ୍ଧାର କରାଯାଇପାରିବ |
E. coli DNA: E. coli 16s rDNA- ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ TaqMan qPCR ଚିହ୍ନଟ ଦର୍ଶାଇଲା ଯେ E.coli ଜେନୋମ ଅବଶିଷ୍ଟ ≤ 0.1pg / ul |
ହୋଷ୍ଟ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଅବଶିଷ୍ଟ:≤ 50 ppm
ଜୀବାଣୁ ଏଣ୍ଡୋଟୋକ୍ସିନ୍: ଚାଇନିଜ୍ ଫାର୍ମାକୋପିୟା IV 2020 ସଂସ୍କରଣ ଅନୁଯାୟୀ LAL- ପରୀକ୍ଷା, ଜେଲ୍ ସୀମା ପରୀକ୍ଷା ପଦ୍ଧତି, ସାଧାରଣ ନିୟମ (1143) |ଜୀବାଣୁ ଏଣ୍ଡୋଟୋକ୍ସିନ ବିଷୟବସ୍ତୁ ≤10 EU / mg ହେବା ଉଚିତ୍ |
ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ ଏବଂ ସର୍ତ୍ତ |
ଉପାଦାନ | | ଭଲ୍ୟୁମ୍ |
BspQ I (10 U / μL) | 1 μL |
DNA | | 1 μg |
10 x BspQ I ବଫର୍ | | 5 μL |
dd H2O | 50 μL ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ |
ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ଅବସ୍ଥା : 50 ℃ |, 1 ~ 16 ଘ।
20 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ଉତ୍ତାପ ନିଷ୍କ୍ରିୟତା : 80 ° C |
ପରାମର୍ଶିତ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ ଏବଂ ଅବସ୍ଥା ଅପେକ୍ଷାକୃତ ଭଲ ଏନଜାଇମ୍ ହଜମ ପ୍ରଭାବ ପ୍ରଦାନ କରିପାରିବ, ଯାହା କେବଳ ରେଫରେନ୍ସ ପାଇଁ, ଦୟାକରି ବିବରଣୀ ପାଇଁ ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ଫଳାଫଳକୁ ଅନୁସରଣ କରନ୍ତୁ |
ଉତ୍ପାଦ ପ୍ରୟୋଗ |
ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ଏଣ୍ଡୋନ୍ୟୁକ୍ଲିଜ୍ ହଜମ, ଦ୍ରୁତ କ୍ଲୋନିଂ |
ଟିପ୍ପଣୀ |
1. ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପରିମାଣର ଏନଜାଇମର ଭଲ୍ୟୁମ୍ ≤ 1/10 |
2. ଗ୍ଲାଇସେରୋଲର ଏକାଗ୍ରତା 5% ରୁ ଅଧିକ ହେଲେ ତାରା କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ହୋଇପାରେ |
3. ସୁପାରିଶ ହୋଇଥିବା ଅନୁପାତରୁ ସବଷ୍ଟ୍ରେଟ୍ ଯେତେବେଳେ କ୍ଲିଭେଜ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ହୋଇପାରେ |