Bst 2.0 DNA ପଲିମେରେଜ୍ (ଗ୍ଲାଇସେରଲ୍ ମୁକ୍ତ, ଉଚ୍ଚ ସାନ୍ଦ୍ରତା)
Bst DNA polymerase V2 Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I ରୁ ଉତ୍ପନ୍ନ, ଯାହାର 5 ′ → 3 ′ DNA ପଲିମେରେଜ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ଏବଂ ଶକ୍ତିଶାଳୀ ଶୃଙ୍ଖଳା ପ୍ରତିସ୍ଥାପନ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ଅଛି, କିନ୍ତୁ 5 ′ → 3 ′ ଏକ୍ସୋନ୍ୟୁକ୍ଲିଜ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ନାହିଁ |Bst DNA Polymerase V2 ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ-ବିସ୍ଥାପନ, ଆଇସୋଥର୍ମାଲ୍ ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ LAMP (ଲୁପ୍ ମଧ୍ୟସ୍ଥ ଆଇସୋଥର୍ମାଲ୍ ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍) ଏବଂ ଦ୍ରୁତ କ୍ରମ ପାଇଁ ଆଦର୍ଶ ଉପଯୁକ୍ତ |ଏହି Bst DNA ପଲିମେରେଜ୍ V2 ରୁମ୍ ତାପମାତ୍ରାରେ DNA ପଲିମେରେଜ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପକୁ ପ୍ରତିରୋଧ କରିବାରେ ସକ୍ଷମ, ଯାହା ଦ୍ it ାରା ଏହା ପରିଚାଳିତ ହୋଇପାରିବ ଏବଂ କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରାରେ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରାଯାଇପାରିବ, ଅଣ-ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ବିସ୍ତାରକୁ ରୋକାଯାଇପାରିବ ଏବଂ ପ୍ରତିକ୍ରିୟାର କାର୍ଯ୍ୟଦକ୍ଷତାକୁ ଉନ୍ନତ କରାଯାଇପାରିବ, ଏବଂ ଏହି ସଂସ୍କରଣ କରିପାରିବ | ଲାଇଫିଲାଇଜ୍ କର |ଏହା ସହିତ, ଏହା ଉତ୍ତାପ ତାପମାତ୍ରାରେ ଏହାର କାର୍ଯ୍ୟକଳାପକୁ ମୁକ୍ତ କରିବାରେ ସକ୍ଷମ, ଏହିପରି ଏକ ପୃଥକ ସକ୍ରିୟ ପଦକ୍ଷେପର ଆବଶ୍ୟକତାକୁ ଦୂର କରିଥାଏ |
ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକ |
| ଉପାଦାନ | | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
| Bst DNA polymerase V2 (Glycerol-free) (32U / μL) | 0.05 mL | 0.25 ମି | 2.5 ମି.ଲି. |
| 10 × HC Bst V2 ବଫର୍ | | 1.5 ମି.ଲି. | 2 × 1.5 ମି | 3 × 10 ମି |
| MgSO4 (100 ମି) | 1.5 ମି.ଲି. | 2 × 1.5 ମି | 2 × 10 ମି |
ପ୍ରୟୋଗଗୁଡ଼ିକ
1.LAMP isothermal amplification |
2.ଡିଏନ୍ଏ ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ ସିଙ୍ଗଲ୍ ବିସ୍ଥାପନ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା |
3.ଉଚ୍ଚ ଜିସି ଜିନ୍ କ୍ରମ |
4.ନାନୋଗ୍ରାମ୍ ସ୍ତରର DNA କ୍ରମ |
ସଂରକ୍ଷଣ ଅବସ୍ଥା
0 ° C ତଳେ ପରିବହନ ଏବଂ -25 ° C ~ -15 ° C ରେ ଗଚ୍ଛିତ |
ୟୁନିଟ୍ ସଂଜ୍ଞା
ଗୋଟିଏ ୟୁନିଟ୍କୁ ଏନଜାଇମର ପରିମାଣ ଭାବରେ ବ୍ୟାଖ୍ୟା କରାଯାଇଛି ଯାହାକି 25 nmol dNTP କୁ 30 ମିନିଟରେ 65 ° C ରେ ଏସିଡ୍ ଦ୍ରବୀଭୂତ ପଦାର୍ଥରେ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରିଥାଏ |
LAMP ପ୍ରତିକ୍ରିୟା |
| ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକ | | 25 μLସିଷ୍ଟମ୍ |
| 10 × HC Bst V2 ବଫର୍ | | 2.5 μL |
| MgSO4 (100 ମି) | 1.5 μL |
| dNTPs (ପ୍ରତ୍ୟେକ 10mM) | 3.5 μL |
| SYTO ™ 16 ସବୁଜ (25 ×)a | 1.0 μL |
| ପ୍ରାଥମିକ ମିଶ୍ରଣ |b | 6 μL |
| Bst DNA ପଲିମେରେଜ୍ V2 (ଗ୍ଲାଇସେରଲ୍ ମୁକ୍ତ) (32 U / uL) | 0.25 μL |
| ଟେମ୍ପଲେଟ୍ | | × μL |
| ddH₂O | 25 μL ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ |
ଟିପ୍ପଣୀ:
1) କ।SYTOTM 16 ସବୁଜ (25 ×): ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ଆବଶ୍ୟକତା ଅନୁଯାୟୀ, ଅନ୍ୟ ରଙ୍ଗଗୁଡିକ ବିକଳ୍ପ ଭାବରେ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରେ;
2) ଖ।ପ୍ରାଥମିକ ମିଶ୍ରଣ: 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2.5 µM F3, 2.5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB ଏବଂ ଅନ୍ୟାନ୍ୟ ଭଲ୍ୟୁମ୍ ମିଶ୍ରଣ ଦ୍ୱାରା ପ୍ରାପ୍ତ |
ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ଏବଂ ଅବସ୍ଥା |
1 × HC Bst V2 ବଫର୍, ଇନକ୍ୟୁବେସନ ତାପମାତ୍ରା 60 ° C ରୁ 65 ° C ମଧ୍ୟରେ |
ଉତ୍ତାପ ନିଷ୍କ୍ରିୟତା |
80 ° C, 20 ମିନିଟ୍
