ଗୋଟିଏ ଷ୍ଟେପ୍ ଫାଷ୍ଟ RT-qPCR ପ୍ରୋବ ପ୍ରେମିକ୍ସ- UNG |
ବିଲେଇ ନଂ: HCR5143A |
ଗୋଟିଏ ଷ୍ଟେପ୍ RT-qPCR ପ୍ରୋବ କିଟ୍ (FOR FAST) ହେଉଛି ଏକ ପ୍ରୋବ-ଆଧାରିତ RT-qPCR ଦ୍ରୁତ ଚିହ୍ନଟ କିଟ୍, ସିଙ୍ଗଲ୍-ପ୍ଲେକ୍ସ କିମ୍ବା ମଲ୍ଟିପ୍ଲେକ୍ସ ପରିମାଣିକ PCR ପାଇଁ RNA କୁ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଭାବରେ ବ୍ୟବହାର କରିଥାଏ (ଯେପରିକି RNA ଜୀବାଣୁ) |ଏହି ଉତ୍ପାଦ ଏକ ନୂତନ ପି generation ଼ିର ଆଣ୍ଟିବଡି-ରୂପାନ୍ତରିତ ଟାକ ଡିଏନ୍ଏ ପଲିମେରେଜ୍ ଏବଂ ଏକ-ଷ୍ଟେପ୍ ଉତ୍ସର୍ଗୀକୃତ ରିଭର୍ସ ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପଟେଜ୍ ବ୍ୟବହାର କରେ, ଦ୍ରୁତ ବିସ୍ତାର ପାଇଁ ଏକ ଅପ୍ଟିମାଇଜ୍ ବଫର୍ ସହିତ, ଯାହାର ଦ୍ରୁତ ବର୍ଦ୍ଧନ ଗତି, ଉଚ୍ଚ ବିସ୍ତାର କ୍ଷମତା ଏବଂ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା ଅଛି |ଏହା ସ୍ୱଳ୍ପ ସମୟ ମଧ୍ୟରେ ଉଭୟ ସିଙ୍ଗଲ୍-ପ୍ଲେକ୍ସ ଏବଂ ମଲ୍ଟିପ୍ଲେକ୍ସରେ ସନ୍ତୁଳିତ ବିସ୍ତାରକୁ ସମର୍ଥନ କରେ |
ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକ |
1. 5 × RT-qPCR ବଫର୍ (U +)
2. ଏନଜାଇମ୍ ମିଶ୍ରଣ (U +)
ଟିପ୍ପଣୀ:
a।5 × RT-qPCR ବଫର୍ (U +) dNTP ଏବଂ Mg ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରେ |2+;
ଖ।ଏନଜାଇମ୍ ମିଶ୍ରଣ (U +) ରେ ଓଲଟା ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପଟେଜ୍, ହଟ୍ ଷ୍ଟାର୍ଟ ଟ୍ୟାକ୍ DNA ପଲିମେରେଜ୍, RNase ଇନହିବିଟର ଏବଂ UDG ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ;
ଗ।RNase- ମୁକ୍ତ ଟିପ୍ସ, ଇପି ଟ୍ୟୁବ୍ ଇତ୍ୟାଦି ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ |
ବ୍ୟବହାର କରିବା ପୂର୍ବରୁ, 5 × RT-qPCR ବଫର୍ (U +) କୁ ଭଲ ଭାବରେ ମିଶାନ୍ତୁ |ଯଦି ଥୋଇବା ପରେ ଯଦି କ prec ଣସି ବୃଷ୍ଟିପାତ ହୁଏ, ତେବେ ବଫର୍ ରୁମ୍ ତାପମାତ୍ରାକୁ ଫେରିବା ପାଇଁ ଅପେକ୍ଷା କରନ୍ତୁ, ମିଶ୍ରଣ କରନ୍ତୁ ଏବଂ ଦ୍ରବଣ କରନ୍ତୁ, ଏବଂ ତାପରେ ସାଧାରଣ ଭାବରେ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ |
ସଂରକ୍ଷଣ ଅବସ୍ଥା
ଉତ୍ପାଦ ଶୁଖିଲା ବରଫ ସହିତ ପଠାଯାଏ ଏବଂ 1 ବର୍ଷ ପାଇଁ -25 ~ -15 at ରେ ଗଚ୍ଛିତ ହୋଇପାରିବ |
ନିର୍ଦ୍ଦେଶାବଳୀ
1. ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ସିଷ୍ଟମ୍
ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକ | | ଭଲ୍ୟୁମ୍ (20 μL) ପ୍ରତିକ୍ରିୟା) |
2 × RT-qPCR ବଫର୍ | | 4μL |
ଏନଜାଇମ୍ ମିଶ୍ରଣ (U +) | 0.8μL |
ପ୍ରାଥମିକ ଅଗ୍ରଗାମୀ | | 0.1 ~ 1.0μM |
ପ୍ରାଥମିକ ଓଲଟା | | 0.1 ~ 1.0μM |
TaqMan Probe | | 0.05 ~ 0.25μM |
ଟେମ୍ପଲେଟ୍ | | X μL |
RNase ମୁକ୍ତ ଜଳ | | 25μL ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ |
ଟିପ୍ପଣୀ: ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପରିମାଣ ହେଉଛି 10-50μL |
2. ସାଇକ୍ଲିଂ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ (S।tandard)
ଚକ୍ର ପଦାଙ୍କ | ଟେମ୍ପ୍ | | ସମୟ | ଚକ୍ରଗୁଡିକ |
ଓଲଟା ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ | | 55 ℃ | 10 ମିନିଟ୍ | 1 |
ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ଅବନତି | 95 ℃ | 30 ସେକେଣ୍ଡ୍ | 1 |
ଅବନତି | 95 ℃ | 10 ସେକେଣ୍ଡ୍ | 45 |
ଆନ୍ନାଲିଙ୍ଗ୍ / ଏକ୍ସଟେନ୍ସନ୍ | | 60 ℃ | 30 ସେକେଣ୍ଡ୍ |
ସାଇକେଲ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ | (ଦ୍ରୁତ) ଚକ୍ର ପଦାଙ୍କ |
ଟେମ୍ପ୍ | |
ସମୟ |
ଚକ୍ରଗୁଡିକ |
ଓଲଟା ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ | | 55 ℃ | 5 ମିନିଟ୍ | 1 |
ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ଅବନତି | 95 ℃ | 5 s | 1 |
ଅବନତି | 95 ℃ | 3 s | 43 |
ଆନ୍ନାଲିଙ୍ଗ୍ / ଏକ୍ସଟେନ୍ସନ୍ | | 60 ℃ | 10 s |
ଟିପ୍ପଣୀ:
a।ଓଲଟା ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ ତାପମାତ୍ରା 50 ℃ ରୁ 60 between ମଧ୍ୟରେ, ତାପମାତ୍ରା ବୃଦ୍ଧି ଜଟିଳ ସଂରଚନା ଏବଂ ଉଚ୍ଚ CG ବିଷୟବସ୍ତୁ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ବୃଦ୍ଧି କରିବାରେ ସାହାଯ୍ୟ କରେ |
ଖ।ପ୍ରାଇମରର Tm ମୂଲ୍ୟ ଉପରେ ଆଧାର କରି ସର୍ବୋଚ୍ଚ ଆନ୍ଲିଙ୍ଗ୍ ତାପମାତ୍ରାକୁ ସଜାଡିବା ଆବଶ୍ୟକ, ଏବଂ ରିଅଲ୍ ଟାଇମ୍ PCR ଉପକରଣ ଉପରେ ଆଧାର କରି ଫ୍ଲୋରୋସେନ୍ସ ସିଗନାଲ୍ ସଂଗ୍ରହ ପାଇଁ ସ୍ୱଳ୍ପ ସମୟ ଚୟନ କରନ୍ତୁ |
ଟିପ୍ପଣୀ |
ଆପଣଙ୍କର ସ୍ୱାସ୍ଥ୍ୟ ଏବଂ ନିରାପତ୍ତା ନିଶ୍ଚିତ କରିବାକୁ ଦୟାକରି ଆବଶ୍ୟକ PPE, ଏହିପରି ଲ୍ୟାବ କୋଟ୍ ଏବଂ ଗ୍ଲୋଭସ୍ ପିନ୍ଧନ୍ତୁ!