ଫସଫାଟେଜ୍ କ୍ଷାର (ALP)
ବର୍ଣ୍ଣନା
କ୍ଷାରୀୟ ଫସଫାଟେଜ୍ ଏକ ରେକମ୍ବିନାଣ୍ଟ ଇ କୋଲି ଷ୍ଟ୍ରେନ୍ ରୁ ଉତ୍ପନ୍ନ ଯାହା TAB5 ଜିନ୍ ବହନ କରେ |ଏନଜାଇମ୍ ଡିଏନ୍ଏ ଏବଂ ଆରଏନ୍ଏ ଫସଫୋମୋନେଷ୍ଟରର 5´ ଏବଂ 3´ ଶେଷର ଡିଫୋସଫୋରୀଲେସନ୍ କାଟାଲାଇଜ୍ କରେ |ଏହାସହ, ଏହା ରିବୋଜ୍ ହାଇଡ୍ରୋଲାଇଜ୍ କରିବା ସହିତ ଡିଓକ୍ସାଇରିବୋନ୍ୟୁକ୍ଲିଓସାଇଡ୍ ଟ୍ରାଇଫୋସଫେଟ୍ (NTP ଏବଂ dNTP) |TAB5 କ୍ଷାରୀୟ ଫସଫାଟେଜ୍ 5´ ପ୍ରୋଟ୍ରୁଡିଙ୍ଗ୍, 5´ ରିସେସ୍ ଏବଂ ଖରାପ ଶେଷରେ କାର୍ଯ୍ୟ କରେ |ଫସଫାଟେଜକୁ ଅନେକ ମଲିକୁଲାର ବାୟୋଲୋଜି ପ୍ରୟୋଗରେ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରିବ, ଯେପରିକି କ୍ଲୋନିଂ କିମ୍ବା ପ୍ରୋବ ଏଣ୍ଡ ଲେବେଲିଂ DNA କିମ୍ବା RNA ର ଫସଫୋରାଇଟେଡ୍ ଶେଷକୁ ହଟାଇବା ପାଇଁ |କ୍ଲୋନିଂ ପରୀକ୍ଷଣରେ, ଡିଫୋସଫୋରୀଲେସନ୍ ର line ଖିକ ପ୍ଲାସିମ୍ DNA କୁ ସ୍ୱ-ଲିଗେସନ୍ ରୁ ରୋକିଥାଏ |ଡିଏନ୍ଏ କ୍ରମ ପାଇଁ ଏକ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରିବାକୁ ଏହା PCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟାରେ ଅବିଭକ୍ତ dNTP ଗୁଡ଼ିକୁ ମଧ୍ୟ ଖରାପ କରିପାରେ |En ୦ ମିନିଟ୍ ପାଇଁ 70 ° C ରେ ଗରମ କରି ଏନ୍ଜାଇମ୍ ସଂପୂର୍ଣ୍ଣ ଏବଂ ଅପ୍ରତ୍ୟାଶିତ ଭାବରେ ନିଷ୍କ୍ରିୟ ହୋଇଯାଏ, ଯାହାଦ୍ୱାରା ଲିଗେସନ୍ ପୂର୍ବରୁ ଫୋସ୍ଫାଟେଜ୍ ଅପସାରଣ କରାଯାଏ କିମ୍ବା ଅନାବଶ୍ୟକ ଲେବଲ୍ କରାଯାଏ |
ବ୍ୟବହାର
ପ୍ରୋଟିନ୍ ସହିତ ଯୋଡି ହୋଇଥିବା ଆଲକାଲାଇନ୍ ଫସଫାଟେଜ୍ (ଆଣ୍ଟିବଡି, ଷ୍ଟ୍ରେପଟାଭିଡିନ ଇତ୍ୟାଦି) ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଭାବରେ ଲକ୍ଷ୍ୟ ଅଣୁଗୁଡ଼ିକୁ ଚିହ୍ନଟ କରିପାରିବ ଏବଂ ଏହାକୁ ELISA, WB ଏବଂ ହିଷ୍ଟୋକେମିକାଲ୍ ଚିହ୍ନଟରେ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରିବ |
2. ଆଲକାଲାଇନ୍ ଫସଫାଟେଜ୍ DNA କିମ୍ବା RNA ର 5 'ଷ୍ଟର୍ମିନାଲ୍ ଡିଫୋସୋରାଇଜ୍ କରିବା ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇପାରେ |
3. ଉପରୋକ୍ତ ଡିଫୋସଫୋରୀଲେଟେଡ୍ DNA କିମ୍ବା RNA ରେଡିଓ-ଲେବଲ୍ ହୋଇଥିବା ଫସଫେଟ୍ (T4 ପଲି-ନ୍ୟୁକ୍ଲିଓଟାଇଡ୍ କିନାସ୍ ମାଧ୍ୟମରେ) ଦ୍ୱାରା ଲେବଲ୍ ହୋଇପାରେ |
ରାସାୟନିକ ଗଠନ
ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟକରଣ
| ପରୀକ୍ଷା ଆଇଟମ୍ | | ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟକରଣ |
| ଏନଜାଇମ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ | | 5U / μL |
| ଏଣ୍ଡୋନ୍ୟୁକ୍ଲିଜ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ | | ଚିହ୍ନଟ ହୋଇନାହିଁ | |
| Exonuuclease କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ | | ଚିହ୍ନଟ ହୋଇନାହିଁ | |
| ନିକ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ | | ଚିହ୍ନଟ ହୋଇନାହିଁ | |
| RNase କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ | | ଚିହ୍ନଟ ହୋଇନାହିଁ | |
| E.coli DNA | ≤1copy / 5U |
| ଏଣ୍ଡୋଟୋକ୍ସିନ୍ | | LAL- ପରୀକ୍ଷା, ≤10EU / ମିଗ୍ରା | |
| ଶୁଦ୍ଧତା | ≥95% |
ପରିବହନ ଏବଂ ସଂରକ୍ଷଣ
ପରିବହନ:ଆମ୍ବିଏଣ୍ଟ୍ |
ସଂରକ୍ଷଣ:2-8 ° C ରେ ଗଚ୍ଛିତ କରନ୍ତୁ |
ପୁନ - ପରୀକ୍ଷା ପାଇଁ ସୁପାରିଶ କରାଯାଇଛି |ଜୀବନ:2 ବର୍ଷ
