Rnase A।
ରିବନୁକ୍ଲାଇଜ୍ ଏ (RNaseA) ହେଉଛି ଏକ ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡେଡ୍ ପଲିପେପ୍ଟାଇଡ୍ ଯାହା ପ୍ରାୟ 13.7 kDa ର ମଲିକୁଲାର୍ ଓଜନ ସହିତ 4 ଟି ଡିସଲଫାଇଡ୍ ବଣ୍ଡ ଧାରଣ କରିଥାଏ |RNase Ais ଏକ ଏଣ୍ଡୋରିବୋନ୍ୟୁକ୍ଲିଜ୍ ଯାହା C ଏବଂ U ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶରେ ଏକକ-ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ RNA କୁ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଭାବରେ ଖରାପ କରିଥାଏ |ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଭାବରେ, କ୍ଲାଭେଜ୍ ଏକ ନ୍ୟୁକ୍ଲିଓଟାଇଡ୍ ର 5'-ରାଇବୋଜ୍ ଏବଂ ଫସଫେଟ୍ ଗ୍ରୁପ୍ ଦ୍ the ାରା ନିର୍ମିତ ପାଇରମିଡାଇନ୍ ନ୍ୟୁକ୍ଲିଓଟାଇଡ୍ ର 3'-ରାଇବୋଜ୍ ଦ୍ formed ାରା ସୃଷ୍ଟି ହୋଇଥିବା ଫସଫୋଡିଏଷ୍ଟର୍ ବଣ୍ଡକୁ ଚିହ୍ନିଥାଏ, ଯାହା ଦ୍ 2,3 ାରା 2,3'-ସାଇକ୍ଲିକ୍ ଫସଫେଟ୍ ଗୁଡିକ ହାଇଡ୍ରୋଲାଇଜ୍ ହୋଇଯାଏ | 'ନ୍ୟୁକ୍ଲିଓସାଇଡ୍ ଫସଫେଟ୍ (ଉଦାହରଣ ସ୍ୱରୂପ, pG-pG-pC-pA-pG pG-pG-pCp ଏବଂ A-PG ସୃଷ୍ଟି କରିବା ପାଇଁ RNase A ଦ୍ୱାରା ଖଣ୍ଡ ଖଣ୍ଡ) |ଏକକ-ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡେଡ୍ RNA କ୍ଲିଭିଙ୍ଗ୍ କରିବାରେ RNase A ସବୁଠାରୁ ସକ୍ରିୟ |ସୁପାରିଶ କରାଯାଇଥିବା କାର୍ଯ୍ୟର ଏକାଗ୍ରତା ହେଉଛି 1- 100 μ G / mL, ବିଭିନ୍ନ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ ସହିତ ସୁସଙ୍ଗତ |କମ୍ ଲୁଣର ଏକାଗ୍ରତା (0-100 mM NaCl) RNA-DNA ହାଇବ୍ରିଡାଇଜେସନ୍ ଦ୍ formed ାରା ଗଠିତ ଏକକ-ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ RNA, ଦୁଇ-ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ RNA ଏବଂ RNA ଶୃଙ୍ଖଳା କାଟିବା ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇପାରେ |
ଯଦିଓ, ଅଧିକ ଲୁଣର ଏକାଗ୍ରତା (≥0.3 M) ରେ, RNase A କେବଳ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଭାବରେ ଏକକ-ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ RNA କୁ ଖଣ୍ଡନ କରେ |
ପ୍ଲାସିମ DNA କିମ୍ବା ଜେନୋମିକ୍ DNA ପ୍ରସ୍ତୁତି ସମୟରେ RNA ଅପସାରଣ ପାଇଁ RNase A ସାଧାରଣତ used ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ |ପ୍ରସ୍ତୁତି ପ୍ରକ୍ରିୟା ସମୟରେ DNase ସକ୍ରିୟ ଅଛି କି ନାହିଁ ତାହା ପ୍ରତିକ୍ରିୟାକୁ ସହଜରେ ପ୍ରଭାବିତ କରିପାରେ |ଜଳ ସ୍ନାନରେ ଫୁଟିବାର ପାରମ୍ପାରିକ ପଦ୍ଧତି DNase କାର୍ଯ୍ୟକଳାପକୁ ନିଷ୍କ୍ରିୟ କରିବା ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇପାରେ |ଏହି ଉତ୍ପାଦରେ DNase ଏବଂ protease ଧାରଣ କରେ ନାହିଁ, ଏବଂ ବ୍ୟବହାର ପୂର୍ବରୁ ଉତ୍ତାପ ଚିକିତ୍ସା ଆବଶ୍ୟକ କରେ ନାହିଁ |ଏଥିସହ, ଏହି ଉତ୍ପାଦକୁ ମଲିକୁଲାର ଜ bi ବ ପରୀକ୍ଷଣରେ ମଧ୍ୟ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରିବ ଯେପରିକି RNase ସୁରକ୍ଷା ବିଶ୍ଳେଷଣ ଏବଂ RNA କ୍ରମ ବିଶ୍ଳେଷଣ |
ସଂରକ୍ଷଣ ଅବସ୍ଥା
ଉତ୍ପାଦକୁ 2 ବର୍ଷ ପାଇଁ -25 ℃ ~ - 15 at ରେ ସଂରକ୍ଷଣ କରାଯିବା ଉଚିତ |
ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟକରଣ
| ଦୃଶ୍ୟ | ପାଉଡର | |
| ପରିମାଣ | 100mg / 1g |
| ଉତ୍ପାଦ ପ୍ରକାର | | RNase A। |
ନିର୍ଦ୍ଦେଶାବଳୀ
RNase A ଷ୍ଟୋରେଜ୍ ସମାଧାନ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରିବା ପାଇଁ ଏହା ଏକ ସାଧାରଣ ପଦ୍ଧତି |ଏହା ମଧ୍ୟ ପ୍ରସ୍ତୁତ ହୋଇପାରେ |ଲାବୋରେଟୋରୀ କିମ୍ବା ରେଫରେନ୍ସ ସାହିତ୍ୟରେ ପାରମ୍ପାରିକ ପଦ୍ଧତି ଅନୁଯାୟୀ ଅନ୍ୟ ପଦ୍ଧତି ଦ୍ୱାରା |10 ମିଟର Tris-HCl, pH 7.5 କିମ୍ବା Tris-NaCl ସମାଧାନରେ ସିଧାସଳଖ ଦ୍ରବୀଭୂତ ହୁଏ)
1. RNase A ଷ୍ଟୋରେଜ୍ ସମାଧାନର 10 ମିଗ୍ରା / ମି.ଏଲ୍ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରିବାକୁ 10 ମିଟର ସୋଡିୟମ୍ ଆସେଟେଟ୍ (pH 5.2) ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ |
2. 15 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ 100 at ରେ ଗରମ କରିବା |
3. କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରାରେ ଥଣ୍ଡା, 1 M Tris-HCl (pH 7.4) ର 1/10 ଭଲ୍ୟୁମ୍ ଯୋଗ କରନ୍ତୁ, ଏହାର pH କୁ 7.4 ରେ ଆଡଜଷ୍ଟ କରନ୍ତୁ |ଉଦାହରଣ ସ୍ୱରୂପ, 500 ମିଗ୍ରା 10 ମିଗ୍ରା / ମିଏଲ୍ RNase ଷ୍ଟୋରେଜ୍ ସମାଧାନ 1 M Tris-HCl, pH7.4) ଯୋଗ କରନ୍ତୁ |
4. ଫ୍ରିଜ୍ ଷ୍ଟୋରେଜ୍ ପାଇଁ -20 at ରେ ସବ୍-ପ୍ୟାକେଜ୍, ଯାହା 2 ବର୍ଷ ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ସ୍ଥିର ହୋଇପାରେ |
[ଟିପ୍ପଣୀ]:
ନିରପେକ୍ଷ ଅବସ୍ଥାରେ RNaseA ସମାଧାନ ଫୁଟାଇବାବେଳେ, RNase ବୃଷ୍ଟିପାତ ହେବ;ଏହାକୁ କମ୍ pH ରେ ଫୁଟାନ୍ତୁ, ଏବଂ ଯଦି ବର୍ଷା ହୁଏ, ତେବେ ଏହା ପାଳନ କରାଯାଇପାରେ, ଯାହା ପ୍ରୋଟିନ୍ ଅପରିଷ୍କାର ଉପସ୍ଥିତି ଦ୍ୱାରା ହୋଇପାରେ |ଯଦି ଫୁଟିବା ପରେ ପଲିଥିନ ମିଳିଥାଏ, ତେବେ ହାଇ ସ୍ପିଡ୍ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗେସନ୍ (13000rpm) ଦ୍ୱାରା ଅପରିଷ୍କାରତା ଅପସାରଣ କରାଯାଇପାରିବ, ଏବଂ ତା’ପରେ ଫ୍ରିଜ୍ ଷ୍ଟୋରେଜ୍ ପାଇଁ ସବ୍-ପ୍ୟାକ୍ କରାଯାଇପାରିବ |
ଟିପ୍ପଣୀ |
ଆପଣଙ୍କର ସ୍ୱାସ୍ଥ୍ୟ ଏବଂ ନିରାପତ୍ତା ନିଶ୍ଚିତ କରିବାକୁ ଦୟାକରି ଆବଶ୍ୟକ PPE, ଏହିପରି ଲ୍ୟାବ କୋଟ୍ ଏବଂ ଗ୍ଲୋଭସ୍ ପିନ୍ଧନ୍ତୁ |
