RT-LAMP କଲର୍ମେଟ୍ରିକ୍ ମାଷ୍ଟର ମିଶ୍ରଣ HCB5204A |
ଏହି ଉତ୍ପାଦରେ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ବଫର୍, ଆରଟି-ଏନଜାଇମ୍ ମିକ୍ସ (ବିଷ୍ଟ ଡିଏନ୍ଏ ପଲିମେରେଜ୍ ଏବଂ ଉତ୍ତାପ-ପ୍ରତିରୋଧୀ ରିଭର୍ସ ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପାଟେଜ୍), ଲାଇଫିଲାଇଜଡ୍ ପ୍ରୋଟେକ୍ଟାଣ୍ଟ ଏବଂ କ୍ରୋମୋଜେନିକ୍ ରଙ୍ଗ ଉପାଦାନ ରହିଛି |ବ୍ୟବହାର କରିବାକୁ, କେବଳ ବଫର୍ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ, ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ଏନଜାଇମ୍ ଏବଂ ପ୍ରାଇମର୍ ମିଶ୍ରିତ ହୋଇ ଟେମ୍ପଲେଟରେ ଯୋଡା ଯାଇଛି |ଲାଇଫିଲାଇଜଡ୍ ପ୍ରୋଟେକ୍ଟାଣ୍ଟ ଯୋଗ କରିବା ସିଧା ହୋଇପାରେ |ଏହା ଏକ ଲାଇଫିଲାଇଜର ଏବଂ ଲାଇଫିଲାଇଜଡ୍ ସହିତ ସଂଯୁକ୍ତ ଥିଲା ଏବଂ ବ୍ୟବହାର ସମୟରେ କେବଳ ପ୍ରାଇମର୍ ଏବଂ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଯୋଗ କରାଯାଇଥିଲା |ଏହି କିଟ୍ ବିସ୍ତାରର ଏକ ଦ୍ରୁତ, ସ୍ୱଚ୍ଛ ଭିଜୁଆଲ୍ ଚିହ୍ନଟ ପ୍ରଦାନ କରିଥାଏ, ଯାହା ନକାରାତ୍ମକ ପ୍ରତିକ୍ରିୟାକୁ ନାଲି ରଙ୍ଗରେ ସୂଚିତ କରାଯାଇଥାଏ ଏବଂ ସକରାତ୍ମକ ପ୍ରତିକ୍ରିୟାରେ ହଳଦିଆ ପରିବର୍ତ୍ତନ ଦ୍ୱାରା ସୂଚିତ କରାଯାଇଥାଏ |
ଉପାଦାନ |
ଉପାଦାନ | | HCB5204A-01 | | HCB5204A-02 | HCB5204A-03 | |
ଲୁପ୍-ମଧ୍ୟସ୍ଥ ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ ବଫର୍ (ରଙ୍ଗ ସହିତ) | | 0.96 ମି | 4.80 mL × 2 | | 9.60 mL × 10 |
ଆରଟି-ଏନଜାଇମ୍ ମିଶ୍ରଣ | | 270 μL | 2.70 mL | 2.70 mL × 10 |
ଲିଓଫିଲାଇଜଡ୍ ପ୍ରୋଟେକ୍ଟାଣ୍ଟ | | 0.96 mL × 2 | | 9.60 mL × 2 | | 9.60 mL × 20 | |
ପ୍ରୟୋଗଗୁଡ଼ିକ
DNA କିମ୍ବା RNA isothermal amplification ପାଇଁ |
ସଂରକ୍ଷଣ ଅବସ୍ଥା
ଶୁଖିଲା ବରଫ ସହିତ ପରିବହନ, -25 ~ -15 at ରେ ଗଚ୍ଛିତ |ବାରମ୍ବାର ଫ୍ରିଜ୍-ଥରୁ ଦୂରେଇ ରୁହନ୍ତୁ, ଉତ୍ପାଦ 12 ମାସ ପାଇଁ ବ valid ଧ ଅଟେ |
ପ୍ରୋଟୋକଲ୍
1.କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରାରେ ବ୍ୟବହୃତ ହେବାକୁ ଥିବା ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ବଫରକୁ ଥବା |ଭଲଭାବେ ମିଶ୍ରଣ କରିବା ପାଇଁ ଭର୍ଟେକ୍ସ ସଂକ୍ଷେପରେ କିମ୍ବା ଟ୍ୟୁବ୍କୁ ଅନେକ ଥର ଓଲଟାଇ ଦିଅ, ତାପରେ ଟ୍ୟୁବ୍ ତଳଭାଗରେ ତରଳ ସଂଗ୍ରହ କରିବାକୁ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗ୍ |
2.ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀର ପ୍ରସ୍ତୁତି |ଏହି ପ୍ରତିକ୍ରିୟାକୁ ଦୁଇଟି ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ, ତରଳ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ମିଶ୍ରଣ ଏବଂ ଲାଇଫିଲାଇଜଡ୍ ସିଷ୍ଟମ୍ ମିଶ୍ରଣରେ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରାଯାଇପାରେ |
1) ତରଳ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ମିଶ୍ରଣ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରନ୍ତୁ |
ଉପାଦାନ | | ଭଲ୍ୟୁମ୍ |
ଲୁପ୍-ମଧ୍ୟସ୍ଥ ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ ବଫର୍ (ରଙ୍ଗ ସହିତ) | | 10 μL |
ଆରଟି-ଏନଜାଇମ୍ ମିଶ୍ରଣ | | 2.8 μL |
10 × ପ୍ରାଥମିକ ମିଶ୍ରଣ |a | 5 μL |
ଟେମ୍ପଲେଟ୍ DNA / RNA | b | × μL |
ନ୍ୟୁକ୍ଲିଜ୍ ମୁକ୍ତ ଜଳ | | 50 μL ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ |
2) ଲିଓଫିଲାଇଜେସନ୍ ସିଷ୍ଟମ୍ ମିଶ୍ରଣ |
Ly ଲାଇଫିଲାଇଜଡ୍ ମିଶ୍ରଣ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରନ୍ତୁ |
ଉପାଦାନ | | ଭଲ୍ୟୁମ୍ |
ଲୁପ୍-ମଧ୍ୟସ୍ଥ ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ ବଫର୍ (ରଙ୍ଗ ସହିତ) | | 10 μL |
ଲିଓଫିଲାଇଜଡ୍ ପ୍ରୋଟେକ୍ଟାଣ୍ଟ | | 20 μL |
ଆରଟି-ଏନଜାଇମ୍ ମିଶ୍ରଣ | | 2.8 μL |
ନ୍ୟୁକ୍ଲିଜ୍ ମୁକ୍ତ ଜଳ | | 50 μL ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ |
Oph ଲିଓଫିଲାଇଜେସନ୍: ପ୍ରସ୍ତୁତ ମିକ୍ସକୁ 50μL ସିଷ୍ଟମରେ ଲାଇଫିଲାଇଜ୍ କରାଯାଇଥିଲା |
Reaction ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ମିଶ୍ରଣ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରନ୍ତୁ |
ଉପାଦାନ | | ଭଲ୍ୟୁମ୍ |
ଲିଓଫିଲାଇଜଡ୍ ମିଶ୍ରଣ | | 1 ଖଣ୍ଡ |
10 × ପ୍ରାଥମିକ ମିଶ୍ରଣ |a | 5 μL |
ଟେମ୍ପଲେଟ୍ DNA / RNA | b | × μL |
ନ୍ୟୁକ୍ଲିଜ୍ ମୁକ୍ତ ଜଳ | | 50 μL ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ |
ଟିପ୍ପଣୀ:
1) କ।10 × ପ୍ରାଥମିକ ମିଶ୍ରଣ: 16 μM FIP / BIP, 2 μM F3 / B3, 4 μM ଲୁପ୍ F / B;
2) ଖ।ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ ଟେମ୍ପଲ୍ ପାଇଁ DEPC (ଜଳ ଦ୍ରବଣ) ସୁପାରିଶ କରାଯାଏ |
1.30-45 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ 65 ° C ରେ ଇନକ୍ୟୁବେଟ୍ କରନ୍ତୁ, ଯାହା ରଙ୍ଗ ପରିବର୍ତ୍ତନ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ସମୟ ଅନୁଯାୟୀ ଉପଯୁକ୍ତ ଭାବରେ ବିସ୍ତାର ହୋଇପାରିବ |
2.ଖାଲି ଆଖି ଅନୁଯାୟୀ ହଳଦିଆ ସକାରାତ୍ମକ ଏବଂ ନାଲି ନକାରାତ୍ମକ ଥିଲା।
ଟିପ୍ପଣୀ |
1.କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରାରେ ଭଲ ଭାବରେ ମିଶ୍ରଣ କରିବା ପାଇଁ ଲୁଣ ବଫର୍ ଟ୍ୟୁବ୍, ଭର୍ଟେକ୍ସ ସଂକ୍ଷେପରେ କିମ୍ବା ଟ୍ୟୁବ୍କୁ ଅନେକ ଥର ଓଲଟାଇ ଦେଇପାରେ |
2.ପ୍ରାଥମିକ ସ୍ଥିତି ଅନୁଯାୟୀ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ତାପମାତ୍ରା 62 ℃ ରୁ 68 between ମଧ୍ୟରେ ଅପ୍ଟିମାଇଜ୍ ହୋଇପାରିବ |
3.ପ୍ୟାକେଜ୍ ହୋଇଥିବା ରେଜେଣ୍ଟଗୁଡିକ ଦୀର୍ଘ ସମୟ ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ବାୟୁରେ ସଂସ୍ପର୍ଶରେ ଆସିବା ଉଚିତ୍ ନୁହେଁ |
4.ଲାଲ୍ ଏବଂ ହଳଦିଆ ରଙ୍ଗର ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀର pH ପରିବର୍ତ୍ତନ ଉପରେ ନିର୍ଭର କରେ, ଦୟାକରି ଧାରଣ କରିଥିବା ଟ୍ରାଇସ୍ ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ ସଂରକ୍ଷଣ ସମାଧାନ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ ନାହିଁ, ddH ବ୍ୟବହାର କରିବାକୁ ପରାମର୍ଶ ଦିଆଯାଇଛି |2ହେ ଗଚ୍ଛିତ ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍;
5.ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ, ଲାଇଫିଲାଇଜେସନ୍, ଏବଂ ନମୁନା ପ୍ରକ୍ରିୟାକରଣ ଏବଂ ନମୁନା ଯୋଗ ପ୍ରକ୍ରିୟା ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରି ପରୀକ୍ଷଣକୁ ମାନକ କରାଯିବା ଉଚିତ୍;
6.ପ୍ରଦୂଷଣକୁ ଏଡାଇବା ପାଇଁ, ଅଲ୍ଟ୍ରା-କ୍ଲିନ୍ ବେଞ୍ଚରେ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରିବାକୁ ପରାମର୍ଶ ଦିଆଯାଇଛି, ମିଥ୍ୟା ସକରାତ୍ମକ ହସ୍ତକ୍ଷେପକୁ ଏଡାଇବା ପାଇଁ ରୁମର ଫ୍ୟୁମ୍ ହୁଡରେ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଯୋଡନ୍ତୁ |