CHO HCP ELISA କିଟ୍ |
ଏହି ଅନୁସନ୍ଧାନରେ ଏକ-ଷ୍ଟେପ୍ ଇମ୍ୟୁନୋସର୍ବାଣ୍ଟ ELISA ପଦ୍ଧତି ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ |CHOK1 HCP ଧାରଣ କରିଥିବା ନମୁନାଗୁଡିକ ଏକାସାଙ୍ଗରେ HRP- ଲେବଲ୍ ହୋଇଥିବା ଛେଳି ଆଣ୍ଟି- CHOK1 ଆଣ୍ଟିବଡି ଏବଂ ELISA ପ୍ଲେଟରେ ଆବୃତ ଆଣ୍ଟି- CHOK1 ଆଣ୍ଟିବଡି ସହିତ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା କରେ, ଶେଷରେ କଠିନ ଫେଜ୍ ଆଣ୍ଟିବଡି- HCP- ଲେବଲ୍ ଆଣ୍ଟିବଡିର ଏକ ସ୍ୟାଣ୍ଡୱିଚ୍ କମ୍ପ୍ଲେକ୍ସ ଗଠନ କଲା |ELISA ପ୍ଲେଟ୍ ଧୋଇ ଅନ୍ବାଉଣ୍ଡ ଆଣ୍ଟିଜେନ୍-ଆଣ୍ଟିବଡି ବାହାର କରାଯାଇପାରିବ |ପର୍ଯ୍ୟାପ୍ତ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପାଇଁ ଟିଏମବି ସବଷ୍ଟ୍ରେଟ୍ କୂଅରେ ଯୋଗ କରାଯାଇଥାଏ |ଷ୍ଟପ୍ ସଲ୍ୟୁସନ୍ ଯୋଡିବା ପରେ ରଙ୍ଗ ବିକାଶ ବନ୍ଦ ହୋଇଯାଏ, ଏବଂ 450/650nm ରେ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ସମାଧାନର OD କିମ୍ବା ଅବଶୋଷଣ ମୂଲ୍ୟ ମାଇକ୍ରୋପ୍ଲେଟ୍ ରିଡର୍ ସହିତ ପ read ାଯାଏ |OD ମୂଲ୍ୟ କିମ୍ବା ଅବଶୋଷଣ ମୂଲ୍ୟ ସମାଧାନରେ HCP ବିଷୟବସ୍ତୁ ସହିତ ଆନୁପାତିକ |ଏଥିରୁ, ସମାଧାନରେ HCP ଏକାଗ୍ରତା ମାନକ ବକ୍ର ଅନୁଯାୟୀ ଗଣନା କରାଯାଇପାରେ |
ଆବେଦନ
ଏହି କିଟ୍ ନମୁନାରେ CHOK1 ହୋଷ୍ଟ ସେଲ୍ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଅବଶିଷ୍ଟ ବିଷୟବସ୍ତୁକୁ ପରିମାଣିକ ଭାବରେ ଚିହ୍ନଟ କରିବା ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ |
Cଉପାଦାନଗୁଡିକ
| S / N | ଉପାଦାନ | | ଏକାଗ୍ରତା | | ସଂରକ୍ଷଣ ଅବସ୍ଥା |
| 1 | CHOK1 HCP ମାନକ | | 0.5mg / mL | ≤ - 20 ℃ |
| 2 | ଆଣ୍ଟି- CHO HCP-HRP | | 0.5mg / mL | ≤ - 20 ℃, ଆଲୋକରୁ ରକ୍ଷା କରନ୍ତୁ | |
| 3 | TMB | NA | 2-8 ℃, ଆଲୋକରୁ ରକ୍ଷା କରନ୍ତୁ | |
| 4 | 20 × PBST 0.05% | | NA | 2-8 ℃ |
| 5 | ସମାଧାନ ବନ୍ଦ କରନ୍ତୁ | | NA | RT |
| 6 | ମାଇକ୍ରୋପ୍ଲେଟ୍ ସିଲର୍ | | NA | RT |
| 7 | BSA | NA | 2-8 ℃ |
| 8 | ଉଚ୍ଚ ଆଡସର୍ପସନ୍ ପ୍ରି-ଆବରଣ ପ୍ଲେଟ୍ | | NA | 2-8 ℃ |
ଯନ୍ତ୍ରପାତି ଆବଶ୍ୟକ |
| ଉପଭୋକ୍ତା / ଯନ୍ତ୍ରପାତି | | ଉତ୍ପାଦନ | କାଟାଲଗ୍ |
| ମାଇକ୍ରୋପ୍ଲେଟ୍ ରିଡର୍ | | ମଲିକୁଲାର ଉପକରଣଗୁଡ଼ିକ | | ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରା ମ୍ୟାକ୍ସ M5, M5e, କିମ୍ବା ସମାନ | |
| ଥର୍ମୋମିକ୍ସର୍ | | Eppendorf | Eppendorf / 5355, କିମ୍ବା ସମାନ | |
| ଭର୍ଟେକ୍ସ ମିକ୍ସର୍ | | IKA | MS3 ଡିଜିଟାଲ୍, କିମ୍ବା ସମାନ | |
ସଂରକ୍ଷଣ ଏବଂ ସ୍ଥିରତା |
1.-25 ~ -15 ° C ରେ ପରିବହନ
2.ସାରଣୀ 1 ରେ ଦେଖାଯାଇଥିବା ପରି ସଂରକ୍ଷଣ ଅବସ୍ଥା;ଉପାଦାନଗୁଡିକ 1-2 ଗଚ୍ଛିତ ≤ - 20 ° C, 5-6 ଗଚ୍ଛିତ RT, 3 、4、7-8 2-8 at ରେ ଗଚ୍ଛିତ ଅଛି;ବ valid ଧତା ଅବଧି ହେଉଛି 12 ମାସ |
ଉତ୍ପାଦ ପାରାମିଟରଗୁଡିକ |
1।ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା: 1ng / mL
୨।ଚିହ୍ନଟ ପରିସର: 3- 100ng / mL |
3ସଠିକତା: ଇଣ୍ଟ୍ରା-ଆସେ CV≤ 10%, ଇଣ୍ଟର-ଆସେ CV≤ 15% |
4HCP କଭରେଜ୍:> 80% |
5ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା: ଏହି କିଟ୍ ସର୍ବଭାରତୀୟ ଅଟେ କାରଣ ଏହା ଶୁଦ୍ଧ ପ୍ରକ୍ରିୟା ଠାରୁ ସ୍ independent ାଧୀନ ଭାବରେ CHOK1 HCP ସହିତ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା କରିଥାଏ |
ପୁନ ag ପ୍ରସ୍ତୁତି |
୧।PBST 0.05% |
15 ମିଲି 20 × PBST 0.05% ନିଅ, ddH ରେ ମିଶ୍ରିତ |2O, ଏବଂ 300 ମିଲି ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ତିଆରି |
୨।1.0% BSA |
ବୋତଲରୁ 1g BSA ନିଅନ୍ତୁ ଏବଂ 100 ମିଲି ମିଟର PBST 0.05% ରେ ମିଶାନ୍ତୁ, ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ଭାବେ ତରଳି ଯିବା ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ଭଲ ଭାବରେ ମିଶାନ୍ତୁ ଏବଂ 2-8 ° C ରେ ରଖନ୍ତୁ |ପ୍ରସ୍ତୁତ ଦିଲ୍ୟୁସନ୍ ବଫର୍ 7 ଦିନ ପାଇଁ ବ valid ଧ ଅଟେ |ଆବଶ୍ୟକ ଅନୁଯାୟୀ ପ୍ରସ୍ତୁତ ହେବାକୁ ପରାମର୍ଶ ଦିଆଯାଇଛି |
3ଚିହ୍ନଟ ସମାଧାନ 2μg / mL |
0.5μ mg / mL ଆଣ୍ଟି- CHO HCP-HRP ର 48μL ନିଅନ୍ତୁ ଏବଂ 2μg / mL ଚିହ୍ନଟ ସମାଧାନର ଅନ୍ତିମ ଏକାଗ୍ରତା ପାଇବା ପାଇଁ 1% BSA ର 11,952μL ରେ ମିଶାନ୍ତୁ |
4QC ଏବଂ CHOK1 HCP ମାନାଙ୍କ ପ୍ରସ୍ତୁତି |
| ନଳି ନା। | ମୂଳ | ଏକାଗ୍ରତା | | ଭଲ୍ୟୁମ୍ | 1% BSA | | ସମୁଦାୟ ଭଲ୍ୟୁମ୍ | ଫାଇନାଲ୍ | |
| A | ମାନକ | 0.5mg / mL | 10 | 490 | 500 | 10,000 |
| B | A | 10,000 | 50 | 450 | 500 | 1,000 |
| S1 | B | 1.000 | 50 | 450 | 500 | 100 |
| S2 | S1 | 100 | 300 | 100 | 400 | 75 |
| S3 | S2 | 75 | 200 | 175 | 375 | 40 |
| S4 | S3 | 40 | 150 | 350 | 500 | 12 |
| S5 | S4 | 12 | 200 | 200 | 400 | 6 |
| S6 | S5 | 6 | 200 | 200 | 400 | 3 |
| NC | NA | NA | NA | 200 | 200 | 0 |
| QC | S1 | 100 | 50 | 200 | 250 | 20 |
ସାରଣୀ: QC ଏବଂ ମାନକ ପ୍ରସ୍ତୁତି |
ଅନୁଧ୍ୟାନ ପ୍ରକ୍ରିୟା |
୧।ଉପରୋକ୍ତ “Reagent Preparation” ରେ ଦର୍ଶାଯାଇଥିବା ପରି ରେଜେଣ୍ଟଗୁଡିକ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରନ୍ତୁ |
୨।ପ୍ରତ୍ୟେକ କୂଅରେ 50μL ମାନକ, ନମୁନା ଏବଂ QC ନିଅନ୍ତୁ (ସାରଣୀ 3 କୁ ଅନୁସରଣ କରନ୍ତୁ), ତାପରେ 100μL ଚିହ୍ନଟ ସମାଧାନ (2μg / mL) ଯୋଗ କରନ୍ତୁ |ପ୍ଲେଟକୁ ସିଲର୍ ସହିତ ଘୋଡାନ୍ତୁ, ଏବଂ ଥର୍ମୋମିକ୍ସର୍ ଉପରେ ELISA ପ୍ଲେଟ୍ ରଖନ୍ତୁ |2 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ 500rpm, 25 ± 3 at ରେ ଇନକ୍ୟୁବେଟ୍ କରନ୍ତୁ |
3ସିଙ୍କରେ ଥିବା ମାଇକ୍ରୋପ୍ଲେଟ୍ କୁ ଓଲଟାଇ ଆବରଣର ସମାଧାନକୁ ପରିତ୍ୟାଗ କର |ELISA ପ୍ଲେଟକୁ ଧୋଇବା ଏବଂ ସମାଧାନକୁ ପରିତ୍ୟାଗ କରିବା ପାଇଁ ପ୍ରତ୍ୟେକ କୂଅରେ ପାଇପେଟ୍ 300μL PBST 0.05% ଏବଂ ଧୋଇବାକୁ 3 ଥର ପୁନରାବୃତ୍ତି କରନ୍ତୁ |ପ୍ଲେଟକୁ ଏକ ସଫା କାଗଜ ଟାୱେଲରେ ଓଲଟାଇ ଶୁଖାନ୍ତୁ |
4ପ୍ରତ୍ୟେକ କୂଅରେ 100μL ofTMB ସବଷ୍ଟ୍ରେଟ୍ ଯୋଡନ୍ତୁ (ସାରଣୀ 1 ଦେଖନ୍ତୁ), ELISA ପ୍ଲେଟକୁ ସିଲ୍ କରନ୍ତୁ ଏବଂ 15 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ 25 ± 3 at ଅନ୍ଧାରରେ ଇନ୍କ୍ୟୁବେଟ୍ କରନ୍ତୁ |
5ପ୍ରତ୍ୟେକ କୂଅରେ ପାଇପ୍ 100μL ଷ୍ଟପ୍ ସଲ୍ୟୁସନ୍ |
6ମାଇକ୍ରୋପ୍ଲେଟ୍ ରିଡର୍ ସହିତ 450 / 650nm ର ତରଙ୍ଗଦ eng ର୍ଘ୍ୟରେ ଅବଶୋଷଣ ମାପ |
7ସଫ୍ଟମାକ୍ସ କିମ୍ବା ସମାନ ସଫ୍ଟୱେର୍ ଦ୍ୱାରା ତଥ୍ୟ ବିଶ୍ଳେଷଣ କରନ୍ତୁ |ଏକ ଚାରି-ପାରାମିଟର ଲଜିଷ୍ଟିକ୍ ରିଗ୍ରେସନ୍ ମଡେଲ୍ ବ୍ୟବହାର କରି ଷ୍ଟାଣ୍ଡାର୍ଡ ବକ୍ର ପ୍ଲଟ୍ କରନ୍ତୁ |
ମାନକ ବକ୍ର ଉଦାହରଣ |
ଟିପ୍ପଣୀ: ଯଦି ନମୁନାରେ HCP ର ଏକାଗ୍ରତା ଷ୍ଟାଣ୍ଡାର୍ଡ ବକ୍ରର ଉପର ସୀମା ଅତିକ୍ରମ କରେ, ପରୀକ୍ଷଣ ପୂର୍ବରୁ ଏହାକୁ ସଠିକ୍ ଭାବରେ ମିଶ୍ରଣ ବଫର୍ ସହିତ ମିଶ୍ରିତ କରାଯିବା ଆବଶ୍ୟକ |
ଟିପ୍ପଣୀ |
ଷ୍ଟପ୍ ସଲ୍ୟୁସନ୍ ହେଉଛି 2 ମି ସଲଫୁରିକ୍ ଏସିଡ୍, ସ୍ପ୍ଲାଶିଂକୁ ଏଡାଇବା ପାଇଁ ଦୟାକରି ଯତ୍ନବାନ ହୁଅନ୍ତୁ!
