DNase I (Rnase Free) (5u / ul)
ବିଲେଇ ନଂ: HC4007A |
DNase I (Deoxyribonuclease I) ହେଉଛି ଏକ ଏଣ୍ଡୋଡକ୍ସାଇରିବୋନ୍ୟୁକ୍ଲିଜ୍ ଯାହା ଏକକ କିମ୍ବା ଦୁଇଗୁଣ DNA ହଜମ କରିପାରିବ |ମୋନୋଡୋକ୍ସିନ୍ୟୁକ୍ଲିଓଟାଇଡ୍ କିମ୍ବା 5- ଟର୍ମିନାଲରେ ଫସଫେଟ୍ ଗ୍ରୁପ୍ ସହିତ ଏକକ କିମ୍ବା ଦୁଇଗୁଣ ବିଶିଷ୍ଟ ଅଲିଗୋଡୋକ୍ସିନ୍ୟୁକ୍ଲିଓଟାଇଡ୍ ଉତ୍ପାଦନ କରିବା ପାଇଁ ଏହା ଫସଫୋଡିଏଷ୍ଟର୍ ବଣ୍ଡକୁ ଚିହ୍ନିଥାଏ ଏବଂ 3'ଟର୍ମିନାଲ୍ ରେ ହାଇଡ୍ରକ୍ସିଲ୍ |DNase I ର କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ Ca ଉପରେ ନିର୍ଭର କରେ |2+ଏବଂ Mn ପରି ବିଭାଜିତ ଧାତୁ ଆୟନ ଦ୍ୱାରା ସକ୍ରିୟ ହୋଇପାରିବ |2+ଏବଂ Zn2+।5 ମିମି Ca2+ଏନଜାଇମକୁ ହାଇଡ୍ରୋଲାଇସିସ୍ ରୁ ରକ୍ଷା କରିଥାଏ |Mg ଙ୍କ ଉପସ୍ଥିତିରେ2+, ଏନଜାଇମ୍ ଅନିୟମିତ ଭାବରେ DNA ର ଯେକ any ଣସି ଷ୍ଟାଣ୍ଡରେ ଯେକ site ଣସି ସାଇଟ୍ ଚିହ୍ନିପାରେ |Mn ଙ୍କ ଉପସ୍ଥିତିରେ2+, ଡିଏନ୍ଏର ଡବଲ୍ ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ ଏକାସାଙ୍ଗରେ ଚିହ୍ନିତ ହୋଇ ପ୍ରାୟ ସମାନ ସ୍ଥାନରେ ଖଣ୍ଡ ହୋଇ ଫ୍ଲାଟ୍ ଏଣ୍ଡ୍ DNA ଖଣ୍ଡ କିମ୍ବା 1-2 ନ୍ୟୁକ୍ଲିଓଟାଇଡ୍ ସହିତ ଷ୍ଟିକି ଏଣ୍ଡ୍ DNA ଖଣ୍ଡ ଗଠନ କରିବାକୁ ହୁଏ |
ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକ |
| ନାମ | 0.1KU | 1KU | 5 KU | 50 KU |
| DNase I, RNase ମୁକ୍ତ | | 20μL | 200μL | 1 ମି | 10 ମି |
| 10 × DNase I ବଫର୍ | | 1 ମି | 1 ମି | 5 × 1mL | 5 × 10 ମି |
ସଂରକ୍ଷଣ ଅବସ୍ଥା
ସଂରକ୍ଷଣ ପାଇଁ -25 ℃ ~ -15;;ବରଫ ପ୍ୟାକ୍ ତଳେ ପରିବହନ |
ନିର୍ଦ୍ଦେଶାବଳୀ
1. ନିମ୍ନରେ ତାଲିକାଭୁକ୍ତ ଅନୁପାତ ଅନୁଯାୟୀ RNase ମୁକ୍ତ ଟ୍ୟୁବରେ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ସମାଧାନ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରନ୍ତୁ:
| ଉପାଦାନ | | ଭଲ୍ୟୁମ୍ |
| RNA | X µg |
| 10 × DNase I ବଫର୍ | | 1μL |
| DNase I, RNase ମୁକ୍ତ (5U / μL) | Rg RNA① ପ୍ରତି 1 U | |
| ddH2O | 10μL ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ |
ଟିପନ୍ତୁ: DN DNase I ର ଭଲ୍ୟୁମ୍ ଗଣନା କରନ୍ତୁ ଯାହା RNA ପରିମାଣ ଉପରେ ଆଧାର କରି ଯୋଡାଯିବା ଆବଶ୍ୟକ |
2. 37 15 15 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ;
3. 2.5mM ~ 5mM ର ଅନ୍ତିମ ଏକାଗ୍ରତାରେ 0.5M EDTA ମିଶାନ୍ତୁ, ଏବଂ ପ୍ରତିକ୍ରିୟାକୁ ବନ୍ଦ କରିବା ପାଇଁ 65 at ରେ 10 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ଗରମ କରନ୍ତୁ |ପରବର୍ତ୍ତୀ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପାଇଁ ନମୁନାକୁ ସିଧାସଳଖ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରିବ ଯେପରିକି ଓଲଟା ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ |ପରୀକ୍ଷଣ |
ୟୁନିଟ୍ ସଂଜ୍ଞା
ଗୋଟିଏ ୟୁନିଟ୍ ଏନଜାଇମର ପରିମାଣ ଭାବରେ ବ୍ୟାଖ୍ୟା କରାଯାଇଛି ଯାହା pBR322 ର 1µg କୁ ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ରୂପେ ଖରାପ କରିବ |37 at ରେ 10 ମିନିଟରେ DNA |
ଗୁଣବତ୍ତା ନିୟନ୍ତ୍ରଣ
RNase:37U ରେ 4 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ 1.6µg MS2 RNA ସହିତ DNase I ର 5U କ no ଣସି ଅବକ୍ଷୟ କରେ ନାହିଁ |ଅଗରୋଜ୍ ଜେଲ୍ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରେସିସ୍ ଦ୍ୱାରା ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରାଯାଏ |
ଟିପ୍ପଣୀ |
1. ଦୟାକରି ନିଜେ 0.5MEDTA ପ୍ରସ୍ତୁତ କରନ୍ତୁ |
2. RNA ର 1g DNase I ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ |ଯଦିଓ, ଯଦି RNA 1µg ରୁ କମ୍, ଦୟାକରି 1U DNase I. ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ |
3. ଅପରେସନ୍ ସମୟରେ ଦୟାକରି ବରଫ ଉପରେ ଏନଜାଇମ୍ ରଖନ୍ତୁ |
