2 × HiF Taq plus Master Mix |
ବିଲେଇ ନଂ: HCR2014B |
HIF ଟ୍ୟାକ୍ ପ୍ଲସ୍ ମାଷ୍ଟର ମିକ୍ସ (ରଙ୍ଗ ସହିତ) ହେଉଛି ଏକ ପ୍ରସ୍ତୁତ-ବ୍ୟବହାର 2 × ପ୍ରିମିକ୍ସଡ୍ ସମାଧାନ ଯାହାକି ପ୍ଲସ୍ HIF DNA ପଲିମେରେଜ୍, dNTP ଏବଂ ଅପ୍ଟିମାଇଜ୍ ବଫର୍ ଧାରଣ କରିଥାଏ |କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରାରେ ଦୁଇଟି ମୋନୋକ୍ଲୋନାଲ ଆଣ୍ଟିବଡି ଯାହା ପଲିମେରେଜ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପକୁ ପ୍ରତିବନ୍ଧିତ କରେ ଏବଂ ′ ′ → 5 ′ ଏକ୍ସୋନ୍ୟୁକ୍ଲିଜ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପକୁ ସହଜ ଏବଂ ଅତ୍ୟଧିକ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ହଟ୍ ଷ୍ଟାର୍ଟ PCR ପାଇଁ ମାଷ୍ଟର ମିଶ୍ରଣରେ ଯୋଡି ଦିଆଯାଏ |ଏନଜାଇମକୁ ଏକ ଲମ୍ବା ଖଣ୍ଡ ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ କ୍ଷମତା ଦେବା ପାଇଁ ଏକ୍ସଟେନ୍ସନ୍ ଫ୍ୟାକ୍ଟର୍ ଯୋଗ କରାଯାଇଛି, ଏମ୍ପ୍ଲାଇଜେସନ୍ ର ଲମ୍ବ 13 kb ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ହୋଇପାରେ, ଏନଜାଇମର 5 ′ → 3 ′ DNA ପଲିମେରେଜ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ଏବଂ 3 ′ → 5 ′ ଅଛି | exonuclease କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ, ଏହାର ବିଶ୍ୱସ୍ତତା ତାକ DNA ପଲିମେରେଜ୍ ତୁଳନାରେ 83 ଗୁଣ, ଯାହା ସାଧାରଣ DNA ପଲିମେରେଜ୍ ତୁଳନାରେ 9 ଗୁଣ |ଏହା ଜଟିଳ ଟେମ୍ପଲେଟଗୁଡିକର ବିସ୍ତାର ପାଇଁ ଉପଯୁକ୍ତ, ବର୍ଦ୍ଧିତ ଉତ୍ପାଦ ଏକ ଅସ୍ପଷ୍ଟ ସମାପ୍ତ |
2 × HIF ଟ୍ୟାକ୍ ପ୍ଲସ୍ ମାଷ୍ଟର ମିକ୍ସ (ରଙ୍ଗ ସହିତ) ଦ୍ରୁତ ଏବଂ ସହଜ, ଉଚ୍ଚ ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା, ଦୃ strong ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା, ଉତ୍ତମ ସ୍ଥିରତା ଇତ୍ୟାଦିର ସୁବିଧା ଅଛି, ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ କେବଳ ପ୍ରାଇମର୍ ଏବଂ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଯୋଡିବା ଆବଶ୍ୟକ କରେ, ଏବଂ ଦୁଇଟି ଦ୍ୱାରା ବୃଦ୍ଧି କରାଯାଇପାରିବ | ଷ୍ଟେପ୍ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍, ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ପଦକ୍ଷେପଗୁଡ଼ିକୁ ସରଳ କରିବା ଏବଂ ସମୟ ସଞ୍ଚୟ କରିବା |ଏହି ଉତ୍ପାଦରେ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରେସିସ୍ ସୂଚକ ରଙ୍ଗ ଥାଏ, ଏବଂ PCR ଉତ୍ପାଦଗୁଡିକ ସିଧାସଳଖ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରେସିସ୍ ପାଇଁ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରିବ |ଏହା ସହିତ, ଉତ୍ପାଦରେ ଏକ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ପ୍ରତିରକ୍ଷା ଏଜେଣ୍ଟ ମଧ୍ୟ ରହିଥାଏ, ଯାହା ଦ୍ master ାରା ମାଷ୍ଟର ମିଶ୍ରଣ ବାରମ୍ବାର ଫ୍ରିଜ୍-ଥ୍ ପରେ ସ୍ଥିର କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ବଜାୟ ରଖିପାରେ |
ସଂରକ୍ଷଣ ଅବସ୍ଥା
ଉତ୍ପାଦଗୁଡିକ 1 ବର୍ଷ ପାଇଁ -25 ~ -15 at ରେ ଗଚ୍ଛିତ ହେବା ଉଚିତ |
ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟକରଣ
ଉତ୍ପାଦ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟକରଣ | | ମାଷ୍ଟର ମିକ୍ସ | |
ଏକାଗ୍ରତା | | 2 × |
ହଟ୍ ଷ୍ଟାର୍ଟ | | ବିଲ୍ଟ-ଇନ୍ ହଟ୍ ଷ୍ଟାର୍ଟ | |
ଓଭରହଙ୍ଗ୍ | | ଅସ୍ପଷ୍ଟ | |
ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ଗତି | ଦ୍ରୁତ |
ଆକାର (ଅନ୍ତିମ ଉତ୍ପାଦ) | 13kb ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ |
ପରିବହନ ପାଇଁ ସର୍ତ୍ତ | | ଶୁଖିଲା ବରଫ | |
ଉତ୍ପାଦ ପ୍ରକାର | | ଉଚ୍ଚ ବିଶ୍ୱସ୍ତତା PCR premixes | |
ନିର୍ଦ୍ଦେଶାବଳୀ
୧।PCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ସିଷ୍ଟମ୍ |
ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକ | | ଭଲ୍ୟୁମ୍ (μL) |
DNA ଟେମ୍ପଲେଟ୍ | | ଉପଯୁକ୍ତ |
ଅଗ୍ରଗାମୀ ପ୍ରାଥମିକ (10 olmol / L) | 2.5। 2.5 |
ଓଲଟା ପ୍ରାଇମର୍ (10 olmol / L) | 2.5। 2.5 |
2 × HIF Taq plus ମାଷ୍ଟର ମିକ୍ସ | | 25 |
ddH2O | ରୁ 50 ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ |
୨।ବିଭିନ୍ନ ଟେମ୍ପଲେଟର ବ୍ୟବହାର ସୁପାରିଶ |
ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ପ୍ରକାର | | 1kb ରୁ 10 kb ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ଖଣ୍ଡଗୁଡ଼ିକୁ ବୃଦ୍ଧି କରନ୍ତୁ | |
ଜେନୋମିକ୍ DNA | | 50ng-200 ng |
ପ୍ଲାସିମ୍ କିମ୍ବା ଭାଇରାଲ୍ DNA | | 10pg-20ng |
cDNA | 1-2.5 µL (ଅନ୍ତିମ PCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପରିମାଣର 10% ଅତିକ୍ରମ କରନ୍ତୁ ନାହିଁ) |
3ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ |
1) ଦୁଇ-ଷ୍ଟେପ୍ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ (ଜଟିଳତା ଟେମ୍ପଲେଟ୍)
ଚକ୍ର ପଦକ୍ଷେପ | ଟେମ୍ପ୍ | | ସମୟ | ଚକ୍ରଗୁଡିକ |
ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ବିଭାଜନ | 98 ℃ | 3 ମିନିଟ୍ | 1 |
ଅବନତି | 98 ℃ | 10sec | 30-35 |
ସମ୍ପ୍ରସାରଣ | 68 ℃ | 30 ସେକେଣ୍ଡ / kb | |
ଅନ୍ତିମ ବିସ୍ତାର | 72 ℃ | 5 ମିନିଟ୍ | 1 |
2) ଥ୍ରୀ-ଷ୍ଟେପ୍ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ (ନିୟମିତ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍)
ଚକ୍ର ପଦକ୍ଷେପ | ଟେମ୍ପ୍ | | ସମୟ | ଚକ୍ରଗୁଡିକ |
ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ବିଭାଜନ | 98 ℃ | 3 ମିନିଟ୍ | 1 |
ଅବନତି | 98 ℃ | 10sec | 30-35 |
ଆନ୍ନାଲିଙ୍ଗ୍ | | 60 ℃ | 20 ସେକେଣ୍ଡ୍ | |
ସମ୍ପ୍ରସାରଣ | 72 ℃ | 30 ସେକେଣ୍ଡ / kb | |
ଅନ୍ତିମ ବିସ୍ତାର | 72 ℃ | 5 ମିନିଟ୍ | 1 |
3) ଆନ୍ଲିଙ୍ଗ୍ ଗ୍ରେଡିଏଣ୍ଟ୍ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ (ଜଟିଳତା ଟେମ୍ପଲେଟ୍)
ଚକ୍ର ପଦକ୍ଷେପ | ତାପମାତ୍ରା | ସମୟ | ଚକ୍ରଗୁଡିକ |
ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ବିଭାଜନ | 98 ℃ | 3 ମିନିଟ୍ | 1 |
ଅବନତି | 98 ℃ | 10 ସେକେଣ୍ଡ୍ | 15 (1 cycle ପ୍ରତି ଚକ୍ର ହ୍ରାସ) |
ଗ୍ରେଡିଏଣ୍ଟ୍ ଆନ୍ଲିଙ୍ଗ୍ | | 70-55 ℃ | 20 ସେକେଣ୍ଡ୍ | |
ସମ୍ପ୍ରସାରଣ | 72 ℃ | 30 ସେକେଣ୍ଡ / kb | |
ଅବନତି | 98 ℃ | 10 ସେକେଣ୍ଡ୍ |
20 |
ଆନ୍ନାଲିଙ୍ଗ୍ | | 55 ℃ | 20 ସେକେଣ୍ଡ୍ | |
ସମ୍ପ୍ରସାରଣ | 72 ℃ | 30 ସେକେଣ୍ଡ / kb | |
ଅନ୍ତିମ ବିସ୍ତାର | 72 ℃ | 5 ମିନିଟ୍ | 1 |
ବିଭିନ୍ନ ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ ଅନ୍ତର୍ଗତ ବ Features ଶିଷ୍ଟ୍ୟଗୁଡିକ |
ପ୍ରୋଟୋକୋl | ଦୁଇ-ସୋପାନ | | ତିନି-ସୋପାନ | | ଗ୍ରେଡିଏଣ୍ଟ୍ ଆନ୍ଲିଙ୍ଗ୍ | |
ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ | | ଦ୍ରୁତ | ମଧ୍ୟମ | ଧୀର |
ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା | | ଉଚ୍ଚ | ମଧ୍ୟମ | ଉଚ୍ଚ |
PCR ଅମଳ | | ମଧ୍ୟମ | ଉଚ୍ଚ | ମଧ୍ୟମ |
ଚିହ୍ନଟ ହାର | ଉଚ୍ଚ | ମଧ୍ୟମ | ଉଚ୍ଚ |
ଟିପ୍ପଣୀ |
ଆପଣଙ୍କର ସ୍ୱାସ୍ଥ୍ୟ ଏବଂ ନିରାପତ୍ତା ନିଶ୍ଚିତ କରିବାକୁ ଦୟାକରି ଆବଶ୍ୟକ PPE, ଏହିପରି ଲ୍ୟାବ କୋଟ୍ ଏବଂ ଗ୍ଲୋଭସ୍ ପିନ୍ଧନ୍ତୁ!