UDG / UNG ଏନଜାଇମ୍ |
UDG (ୟୁରାସିଲ୍ ଡିଏନ୍ଏ ଗ୍ଲାଇକୋସାଇଲେସ୍) ୟୁରାସିଲ୍ ବେସ୍ ଏବଂ ssDNA ଏବଂ dsDNA ରେ ଚିନି-ଫସଫେଟ୍ ମେରୁଦଣ୍ଡ ମଧ୍ୟରେ ଥିବା ଏନ-ଗ୍ଲାଇକୋସିଡିକ୍ ଲିଙ୍କ୍ ର ହାଇଡ୍ରୋଲାଇସିସ୍ କାଟାଲାଇଜ୍ କରିପାରିବ |ଏହା ସହଜରେ ଏରୋସୋଲ୍ ପ୍ରଦୂଷଣକୁ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କରିପାରିବ ଏବଂ ସାଧାରଣ ମଲିକୁଲାର ଜ bi ବ ପ୍ରଣାଳୀ ଯେପରିକି PCR, qPCR, RT-qPCR ଏବଂ LAMP ପାଇଁ ଉପଯୁକ୍ତ |
ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟକରଣ
| ଏକ୍ସପ୍ରେସନ୍ ହୋଷ୍ଟ | ରେକମ୍ବିନାଣ୍ଟ ଇ କୋଲିୱିଥ୍ ୟୁରାସିଲ୍ DNA ଗ୍ଲାଇକୋସାଇଲେସ୍ ଜିନ୍ | |
| ମଲିକୁଲାର ଓଜନ | | 24. 8kDa |
| ଶୁଦ୍ଧତା | ≥95% (SDS-PAGE) |
| ଉତ୍ତାପ ନିଷ୍କ୍ରିୟତା | | 95 ℃, 5 ~ 10 ମିନିଟ୍ | |
| ୟୁନିଟ୍ ସଂଜ୍ଞା | ଗୋଟିଏ ୟୁନିଟ୍ (U) କୁ ଏନଜାଇମର ପରିମାଣ ଭାବରେ ବ୍ୟାଖ୍ୟା କରାଯାଇଛି ଯାହାକି 25 μ ରେ 30 ମିନିଟରେ l μg dU ଧାରଣକାରୀ dsDNA ର ହାଇଡ୍ରୋଲାଇସିସ୍ କାଟାଲାଇଜ୍ କରିବା ପାଇଁ ଆବଶ୍ୟକ | |
ଭଣ୍ଡାର
ଉତ୍ପାଦକୁ ଦୁଇ ବର୍ଷ ପାଇଁ -25 ℃ -15 ° C ରେ ସଂରକ୍ଷଣ କରାଯିବା ଉଚିତ |
ନିର୍ଦ୍ଦେଶାବଳୀ
1.ନିମ୍ନଲିଖିତ ସିଷ୍ଟମ ଅନୁଯାୟୀ PCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ମିଶ୍ରଣର ପ୍ରସ୍ତୁତି |
| ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକ | | ଭଲ୍ୟୁମ୍ (μL) | ଅନ୍ତିମ ଏକାଗ୍ରତା | |
| 10 × PCR ବଫର୍ (Mg² + Plus) | 5 | 1 × |
| 25 mmol / LMgCl | | 3 | 1.5 mmol / L |
| dUTP (10 mmol / L) | 3 | 0.6 mmol / L |
| dCTP / dGTP / dATP / dTTP (10mmol / Leach) | 1 | 0.2 mmol / Leach |
| ଟେମ୍ପଲେଟ୍ DNA | | X | - |
| Primer1 (10μmol / L) | 2 | 0.4 olmol / L |
| ପ୍ରାଥମିକ 2 (10μmol / L) | 2 | 0.4 olmol / L |
| Taq DNA ପଲିମେରେଜ୍ (5 U / μL) | 0. 5 | 0. 05 U / μL | |
| Uracil DNA Glycosylase (UDG / UNG), 1 U / μL | | 1 | 1 U / μL |
| ddH₂O | 50 ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ | - |
ଧ୍ୟାନ ଦିଅନ୍ତୁ: ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ଆବଶ୍ୟକତା ଅନୁଯାୟୀ, DUTP ର ଅନ୍ତିମ ଏକାଗ୍ରତା 0.2-0.6 mmol / L ମଧ୍ୟରେ ଆଡଜଷ୍ଟ ହୋଇପାରିବ ଏବଂ 0.2 mmol / L dTTP ଚୟନକରି ଯୋଗ କରାଯାଇପାରିବ |
2.ବୃଦ୍ଧି ପ୍ରକ୍ରିୟା
| ଚକ୍ର ପଦକ୍ଷେପ | ତାପମାତ୍ରା | ସମୟ | ଚକ୍ରଗୁଡିକ |
| dU ଧାରଣ କରିଥିବା ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଅବକ୍ଷୟ | | 25 ℃ | 10 ମିନିଟ୍ | 1 |
| UDG ଆକ୍ଟିଭେସନ୍, ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ଅବନତି | | 95 ℃ | 5 ~ 10 ମିନିଟ୍ | | 1 |
| ଅବନତି | 95 ℃ | 10 ସେକେଣ୍ଡ୍ |
30-35 |
| ଆନ୍ନାଲିଙ୍ଗ୍ | | 60 ℃ | 20 ସେକେଣ୍ଡ୍ | |
| ସମ୍ପ୍ରସାରଣ | 72 ℃ | 30sec / kb | |
| ଅନ୍ତିମ ବିସ୍ତାର | 72 ℃ | 5 ମିନିଟ୍ | 1 |
ଧ୍ୟାନ ଦିଅନ୍ତୁ: 25 ° C ରେ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ସମୟ ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ଆବଶ୍ୟକତା ଅନୁଯାୟୀ 5-10 ମିନିଟ୍ ମଧ୍ୟରେ ଆଡଜଷ୍ଟ ହୋଇପାରେ |
ଟିପ୍ପଣୀ |
1.ଅଧିକାଂଶ PCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ବଫର୍ରେ UDG ସକ୍ରିୟ |
2.ଏନଜାଇମଗୁଡିକ ଏକ ବରଫ ବାକ୍ସରେ କିମ୍ବା ବରଫ ସ୍ନାନରେ ବ୍ୟବହାର କରାଯିବା ଉଚିତ ଏବଂ ବ୍ୟବହାର ପରେ ତୁରନ୍ତ -20 ° C ରେ ସଂରକ୍ଷଣ କରାଯିବା ଉଚିତ |
3.ଆପଣଙ୍କର ସ୍ୱାସ୍ଥ୍ୟ ଏବଂ ନିରାପତ୍ତା ନିଶ୍ଚିତ କରିବାକୁ ଦୟାକରି ଆବଶ୍ୟକ PPE, ଏହିପରି ଲ୍ୟାବ କୋଟ୍ ଏବଂ ଗ୍ଲୋଭସ୍ ପିନ୍ଧନ୍ତୁ!
