ମଲ୍ଟିପ୍ଲେକ୍ସ ଏକ ଷ୍ଟେପ୍ RT-qPCR ପ୍ରେମିକ୍ସ- UNG |
ବିଲେଇ ନଂ: HCB5145A |
ମଲ୍ଟିପ୍ଲେକ୍ସ ୱାନ ଷ୍ଟେପ୍ RT-qPCR ପ୍ରୋବ କିଟ୍ (UDG ପ୍ଲସ୍) ହେଉଛି ଏକ ମଲ୍ଟିପ୍ଲେକ୍ସ ପରିମାଣିକ PCR କିଟ୍ ଯାହା ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଭାବରେ RNA ଉପରେ ଆଧାରିତ |ପରୀକ୍ଷଣ ପ୍ରକ୍ରିୟାରେ ସମାନ ଟ୍ୟୁବରେ ଓଲଟା ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ ଏବଂ ପରିମାଣିକ PCR କରାଯାଇଥିଲା, ଯାହା ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ କାର୍ଯ୍ୟକୁ ସରଳ କରି ପ୍ରଦୂଷଣର ଆଶଙ୍କା ହ୍ରାସ କରିଥିଲା |ଏହି କିଟ୍ ରେ, ପ୍ରଥମ ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ cDNA ଉତ୍ତାପ-ପ୍ରତିରୋଧକ ରିଭର୍ସ ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପଟେଜ୍ ଦ୍ୱାରା ଦକ୍ଷତାର ସହିତ ସିନ୍ଥାଇଜ୍ ହୋଇଥିଲା ଏବଂ ହଟଷ୍ଟାର୍ଟ ଟ୍ୟାଗ୍ DNA ପଲିମେରେଜ୍ ଦ୍ୱାରା ପରିମାଣିକ ଭାବରେ ବୃଦ୍ଧି କରାଯାଇଥିଲା |କିଟ୍ ମୁଖ୍ୟତ optim ଅପ୍ଟିମାଇଜଡ୍ MP ବଫର୍, ଏନଜାଇମ୍ ମିଶ୍ରଣ ଇତ୍ୟାଦି ଧାରଣ କରିଥାଏ | ବଫର୍ ସମାଧାନ ପୂର୍ବରୁ Mg ଧାରଣ କରିଥାଏ |2+ଏବଂ dNTP |ଏଥିସହ, ଅଣ-ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ PCR ବିସ୍ତାରକୁ ପ୍ରଭାବଶାଳୀ ଭାବରେ ପ୍ରତିବନ୍ଧିତ କରିପାରେ ଏବଂ ଏକାଧିକ qPCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟାର ବର୍ଦ୍ଧିତ ଦକ୍ଷତାକୁ ଉନ୍ନତ କରିପାରିବ, ଯାହା ବର୍ଦ୍ଧନ ଦକ୍ଷତାକୁ ସୁନିଶ୍ଚିତ କରିପାରିବ ଏବଂ ଏକାଧିକ ବିସ୍ତାର ପ୍ରତିକ୍ରିୟାକୁ କାର୍ଯ୍ୟକାରୀ କରିପାରିବ |ଏରୋସୋଲ ପ୍ରଦୂଷଣର ବିପଦକୁ ପ୍ରଭାବଶାଳୀ ଭାବରେ ରୋକିବା ପାଇଁ DUTP / UDG ସିଷ୍ଟମ ଯୋଗ କରାଯାଇଥିଲା |
ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକ |
1. ବଫର୍
2. ଏନଜାଇମ୍ ମିଶ୍ରଣ |
ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟକରଣ
| ହଟ୍ ଷ୍ଟାର୍ଟ | | ବିଲ୍ଟ-ଇନ୍ ଗରମ ଆରମ୍ଭ | |
| ଚିହ୍ନଟ ପଦ୍ଧତି | | ପ୍ରାଥମିକ-ଅନୁସନ୍ଧାନ ଚିହ୍ନଟ | |
| PCR ପଦ୍ଧତି | | ଗୋଟିଏ ପଦକ୍ଷେପ RT-qPCR | |
| ପଲିମେରେଜ୍ | | Taq DNA ପଲିମେରେଜ୍ | |
| ନମୁନା ପ୍ରକାର | | DNA | |
ସଂରକ୍ଷଣ ଅବସ୍ଥା
ଉତ୍ପାଦ ଶୁଖିଲା ବରଫ ସହିତ ପଠାଯାଏ ଏବଂ 1 ବର୍ଷ ପାଇଁ -25 ~ -15 at ରେ ଗଚ୍ଛିତ ହୋଇପାରିବ |ଏହା ବାରମ୍ବାର ଏଡ଼ାଇବା ଉଚିତ୍ |ଫ୍ରିଜ୍-ଥ୍ |ପୃଥକ ଭାବରେ ସଞ୍ଚୟ କରିବାକୁ ପରାମର୍ଶ ଦିଆଯାଇଛି |
ନିର୍ଦ୍ଦେଶାବଳୀ
1.ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ସିଷ୍ଟମ୍
| ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକ | | ଭଲ୍ୟୁମ୍ (μL) | ଅନ୍ତିମ ଏକାଗ୍ରତା | |
| 2 × ସାଂସଦ ବଫର୍ | | 12.5 | 1 × |
| ଏନଜାଇମ୍ ମିଶ୍ରଣ | | 1 | - |
| ପ୍ରାଥମିକ / ଅନୁସନ୍ଧାନ ମିଶ୍ରଣ (2.5 μM) | 3 | 0.3μM |
| ଟେମ୍ପଲେଟ୍ RNA | | 1-10 | - |
| RNase ମାଗଣା H2O | | ରୁ 25 | - |
ଟିପ୍ପଣୀ:
ବ୍ୟବହାର ପୂର୍ବରୁ ଭଲ ଭାବରେ ମିଶ୍ରଣ କରିବାକୁ ନିଶ୍ଚିତ ହୁଅନ୍ତୁ, ହିଂସାତ୍ମକ କମ୍ପନ ଦ୍ୱାରା ସୃଷ୍ଟି ହୋଇଥିବା ଅତ୍ୟଧିକ ବୁବୁଲରୁ ଦୂରେଇ ରୁହନ୍ତୁ |
a।ପ୍ରାଥମିକ ଏକାଗ୍ରତା: ମଲ୍ଟିପ୍ଲେକ୍ସ ପ୍ରାଇମର୍ ସହିତ ପ୍ରାଇମର୍ ମିଶ୍ରଣ, ପରିସ୍ଥିତି ଉପରେ ନିର୍ଭର କରି ସର୍ବୋଚ୍ଚ ପ୍ରାଥମିକ ଏକାଗ୍ରତା ହୁଏତ 0.l ରୁ 1.0μM ମଧ୍ୟରେ |
ଖ।ପ୍ରୋବ ଏକାଗ୍ରତା: ମଲ୍ଟିପ୍ଲେକ୍ସ ପ୍ରୋବ ଲେବେଲିଂ ପାର୍ଥକ୍ୟ ଫ୍ଲୋରୋସେଣ୍ଟ ଗୋଷ୍ଠୀ ସହିତ ପ୍ରୋବ ମିଶ୍ରଣ, ପରିସ୍ଥିତି ଅନୁକୂଳ ପ୍ରୋବ ଏକାଗ୍ରତା ଉପରେ ନିର୍ଭର କରି ବୋଧହୁଏ 0.05 ରୁ 0.5μM ମଧ୍ୟରେ |
ଗ।ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ମିଶ୍ରଣ: qPCR ଅତ୍ୟନ୍ତ ସମ୍ବେଦନଶୀଳ ଏବଂ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ କୁ ହାଲୁକା କରିବାକୁ ପରାମର୍ଶ ଦିଆଯାଇଛି |କଣ୍ଟ୍ରୋଲ୍ Ct ମୂଲ୍ୟ 20 ରୁ 35 ମଧ୍ୟରେ ଉପଯୁକ୍ତ ଅଟେ |
d।ସିଷ୍ଟମ୍ ପ୍ରସ୍ତୁତି: ଦୟାକରି ଅଲ୍ଟ୍ରା କ୍ଲିନ୍ ୱାର୍କିଂ ଟେବୁଲରେ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରନ୍ତୁ, ଏବଂ ନ୍ୟୁକ୍ଲିଜ୍ ଅବଶିଷ୍ଟ ବିନା ପାଇପେଟର୍ ଏବଂ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ଟ୍ୟୁବ୍ |ବନ୍ଧୁକ ମୁଣ୍ଡକୁ ଫିଲ୍ଟର ଉପାଦାନ ସହିତ ବ୍ୟବହାର କରିବାକୁ ପରାମର୍ଶ ଦିଆଯାଇଛି |କ୍ରସ୍ ପ୍ରଦୂଷଣ ଏବଂ ଏରୋସୋଲ୍ ପ୍ରଦୂଷଣରୁ ଦୂରେଇ ରୁହନ୍ତୁ |
2. ଅପ୍ଟିମାଇଜ୍ ସାଇକେଲ ଚଲାଇବା |ପ୍ରୋଟୋକଲ୍
| ଚକ୍ର ପଦାଙ୍କ | ଟେମ୍ପ୍ | | ସମୟ | ଚକ୍ରଗୁଡିକ |
| ଓଲଟା ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ | | 50 ℃a | 20 ମିନିଟ୍ | 1 |
| ପ୍ରାରମ୍ଭିକ-ବିଭାଜନ | 95 ℃ | 5 ମିନିଟ୍ | 1 |
| ବୃଦ୍ଧି ପ୍ରତିକ୍ରିୟା | 95 ℃ | 15 ସେକେଣ୍ଡ୍ |
40-45 |
| 60 ℃ b | 30 ସେକେଣ୍ଡ୍ c |
ଟିପ୍ପଣୀ:
a।ଓଲଟା ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍: ତାପମାତ୍ରା 42 ° C କିମ୍ବା 50 ° C ଚୟନ କରିପାରିବ |
ଖ।ବିସ୍ତାର ପ୍ରତିକ୍ରିୟା: ଡିଜାଇନ୍ ହୋଇଥିବା ପ୍ରାଇମର୍ ଗୁଡିକର Tm ମୂଲ୍ୟ ଅନୁଯାୟୀ ତାପମାତ୍ରା ସଜାଡିଥାଏ |
ଗ।ଫ୍ଲୋରୋସେନ୍ସ ସିଗନାଲ୍ ଅଧିଗ୍ରହଣ: ଦୟାକରି ଉପକରଣ ମାନୁଆଲ୍ର ଆବଶ୍ୟକତା ଅନୁଯାୟୀ ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ପ୍ରଣାଳୀ ସେଟ୍ କରନ୍ତୁ |
ଟିପ୍ପଣୀ |
ଆପଣଙ୍କର ସ୍ୱାସ୍ଥ୍ୟ ଏବଂ ନିରାପତ୍ତା ନିଶ୍ଚିତ କରିବାକୁ ଦୟାକରି ଆବଶ୍ୟକୀୟ PPE ପରିଧାନ କରନ୍ତୁ, ଯେପରିକି ଲ୍ୟାବ କୋଟ୍ ଏବଂ ଗ୍ଲୋଭସ୍ |
