ଅଲ୍ଟ୍ରା ନ୍ୟୁକ୍ଲିଜ୍ ଜିଏମ୍ପି-ଗ୍ରେଡ୍ |
ବିଲେଇ ନଂ: HC2016A |
ଅଲଟ୍ରା ନ୍ୟୁକ୍ଲିଜ୍ ଜିଏମ୍ପି-ଗ୍ରେଡ୍ ଇସେରିଚିଆ କୋଲି (ଇ.କୋଲି) ରେ ଜେନେଟିକ୍ ଇଞ୍ଜିନିୟରିଂ ଏବଂ ଜିଏମ୍ପି ପରିବେଶରେ ପ୍ରସ୍ତୁତ ହୋଇ ପ୍ରକାଶ କରାଯାଇଥାଏ |ଏହା ବ scientific ଜ୍ଞାନିକ ଅନୁସନ୍ଧାନରେ କୋଷ ସୁପରନେଟାଣ୍ଟ ଏବଂ ସେଲ୍ ଲାଇସେଟ୍ ର ସାନ୍ଦ୍ରତାକୁ ହ୍ରାସ କରିପାରେ, ପ୍ରୋଟିନ୍ ଶୁଦ୍ଧତା ଦକ୍ଷତା ବୃଦ୍ଧି କରିଥାଏ ଏବଂ ପ୍ରୋଟିନ୍ କାର୍ଯ୍ୟକ୍ଷମ ଅନୁସନ୍ଧାନକୁ ବ enhance ାଇଥାଏ |ଏହି ଉତ୍ପାଦ ହୋଷ୍ଟ ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶକୁ pg- ଗ୍ରେଡ୍ କୁ ହ୍ରାସ କରିପାରେ, ଜୀବାଣୁ ଶୁଦ୍ଧତା, ଟିକା ଉତ୍ପାଦନ ଏବଂ ପ୍ରୋଟିନ୍ / ପଲିସାକାରାଇଡ୍ ଫାର୍ମାସ୍ୟୁଟିକାଲ୍ ଉତ୍ପାଦନ ସହିତ ପ୍ରୟୋଗର ଜ bi ବିକ ଉତ୍ପାଦଗୁଡିକର କାର୍ଯ୍ୟଦକ୍ଷତା ଏବଂ ନିରାପତ୍ତାକୁ ଉନ୍ନତ କରିପାରିବ |ଏହା ବ୍ୟତୀତ ସେଲ୍ ଥେରାପି ଏବଂ ଟିକା ବିକାଶରେ ମାନବ ପେରିଫେରାଲ୍ ରକ୍ତ ମୋନୋନ୍ୟୁକ୍ଲିୟର କୋଷ (PBMC) ର ump ୁଲାକୁ ରୋକିବା ପାଇଁ ଏହି ଉତ୍ପାଦକୁ ମଧ୍ୟ ପ୍ରୟୋଗ କରାଯାଇପାରିବ |
ଅଲ୍ଟ୍ରା ନ୍ୟୁକ୍ଲିଜ୍ ଏକ ନିର୍ଜଳ ରିଜେଣ୍ଟ୍ ଆକାରରେ ପ୍ରଦାନ କରାଯାଇଛି, ଯାହା ବଫରରେ ବ uted ଼ିଛି (20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glycerin), ଏକ ରଙ୍ଗହୀନ, ସ୍ୱଚ୍ଛ ତରଳ ପରି ଦେଖାଯାଏ |ଏହି ଉତ୍ପାଦ GMP ପ୍ରକ୍ରିୟା ଆବଶ୍ୟକତା ଦ୍ produced ାରା ଉତ୍ପାଦିତ ହୁଏ ଏବଂ ଏକ ତରଳ ଆକାରରେ ପ୍ରଦାନ କରାଯାଏ |
ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକ |
ଅଲଟ୍ରା ନ୍ୟୁକ୍ଲିଜ୍ ଜିଏମ୍ପି-ଗ୍ରେଡ୍ (250 U / μL)
ସଂରକ୍ଷଣ ଅବସ୍ଥା
ଉତ୍ପାଦଟି ଶୁଖିଲା ବରଫ ସହିତ ପଠାଯାଏ ଏବଂ ଦୁଇ ବର୍ଷ ପାଇଁ -25 ℃ ~ -15 ° C ରେ ଗଚ୍ଛିତ ହୋଇପାରିବ |
ଯଦି ଉତ୍ପାଦ ଖୋଲାଯାଏ ଏବଂ ଏକ ସପ୍ତାହରୁ ଅଧିକ ସମୟ ପାଇଁ 4 at ରେ ଗଚ୍ଛିତ ହୋଇଛି, ଆମେ ଫିଲ୍ଟର କରିବାକୁ ସୁପାରିଶ କରୁ |ମାଇକ୍ରୋବାୟଲ୍ ପ୍ରଦୂଷଣକୁ ରୋକିବା ପାଇଁ ଉତ୍ପାଦ |
ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟକରଣ
| ଏକ୍ସପ୍ରେସନ୍ ହୋଷ୍ଟ | ଅଲଟ୍ରା ନ୍ୟୁକ୍ଲିଜ୍ ଜିନ୍ ସହିତ ରେକମ୍ବିନାଣ୍ଟ ଇ କୋଲି | |
| ମଲିକୁଲାର ଓଜନ | | 26.5 kDa |
| ସୋଲେକ୍ଟ୍ରିକ୍ ପଏଣ୍ଟ | | 6.85 |
| ଶୁଦ୍ଧତା | ≥99% (SDS-PAGE) |
| ଷ୍ଟୋରେଜ୍ ବଫର୍ | | 20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glycerin |
|
ୟୁନିଟ୍ ସଂଜ୍ଞା | ଗୋଟିଏ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ୟୁନିଟ୍ (U) ର ସଂଜ୍ଞା ହେଉଛି ବ୍ୟବହୃତ ଏନଜାଇମର ପରିମାଣ |6A260 ର ଅବଶୋଷଣ ମୂଲ୍ୟକୁ 2 625 mL ରେ 30 ମିନିଟରେ 1.0 ରେ ପରିବର୍ତ୍ତନ କରନ୍ତୁ |ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ 37 at ରେ pH ସହିତ 8.0 (ସଂପୂର୍ଣ୍ଣ ହଜମ ସହିତ ସମାନ) |37 μg ସଲମାନ ଶୁକ୍ରାଣୁ DNA ଅଲିଗ୍ନୁକ୍ଲାଏଟାଇଡ୍ସରେ) | |
ନିର୍ଦ୍ଦେଶାବଳୀ
1. ନମୁନା ସଂଗ୍ରହ
ଅନୁକରଣକାରୀ କୋଷଗୁଡିକ: ମାଧ୍ୟମକୁ ଅପସାରଣ କରନ୍ତୁ, କୋଷଗୁଡ଼ିକୁ PBS ସହିତ ଧୋଇ ଦିଅନ୍ତୁ ଏବଂ ଅଲ ern କିକ ପଦାର୍ଥକୁ ବାହାର କରନ୍ତୁ |
ନିଲମ୍ବନ କୋଷଗୁଡିକ: ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗେସନ୍ ଦ୍ cells ାରା କୋଷଗୁଡିକ ସଂଗ୍ରହ କରନ୍ତୁ, କୋଷଗୁଡ଼ିକୁ PBS ସହିତ ଧୋଇ ଦିଅନ୍ତୁ, 6,000 ରେ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗ୍ |10 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ rpm, ପେଲେଟ୍ ସଂଗ୍ରହ କରନ୍ତୁ |
ଇଚେରିଚିଆ କୋଲି: ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗେସନ୍ ଦ୍ bacter ାରା ଜୀବାଣୁ ସଂଗ୍ରହ କରନ୍ତୁ, ପିବିଏସ୍ ସହିତ ଥରେ ଧୋଇ ଦିଅନ୍ତୁ, ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗ୍ 8,000 ରେ |5 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ rpm, ଏବଂ ପେଲେଟ୍ ସଂଗ୍ରହ କରନ୍ତୁ |
2. ନମୁନା ଚିକିତ୍ସା
ସଂଗୃହିତ କୋଷ ପେଲେଟଗୁଡିକ ଲାଇସିସ୍ ବଫର୍ ସହିତ ମାସ (g) ଅନୁପାତରେ (mL) 1: (10-20) ଅନୁପାତରେ, କିମ୍ବା ବରଫରେ କିମ୍ବା କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରାରେ ଯାନ୍ତ୍ରିକ କିମ୍ବା ରାସାୟନିକ ପଦ୍ଧତି ଦ୍ 1 ାରା ଚିକିତ୍ସା କର (1g ସେଲ୍ ପେଲେଟ୍ ଧାରଣ କରେ)
109 କକ୍ଷ)
3. ଏନଜାଇମ୍ ଚିକିତ୍ସା |
ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀରେ 1-5mM MgCl ଯୋଡନ୍ତୁ ଏବଂ pH କୁ 8-9 ରେ ଆଡଜଷ୍ଟ କରନ୍ତୁ |
250 ୟୁନିଟ୍ ଅନୁପାତ ଅନୁଯାୟୀ ଅଲଟ୍ରା ନ୍ୟୁକ୍ଲିଜ୍ ଯୋଡନ୍ତୁ, 1 ଗ୍ରାମ ସେଲ୍ ପେଲେଟ୍ ହଜମ କରନ୍ତୁ, 30 at ରୁ ଅଧିକ ସମୟ ପାଇଁ 37 at ରେ ଇନ୍କ୍ୟୁବେଟ୍ କରନ୍ତୁ |ଚୟନ କରିବାକୁ ଦୟାକରି “ସୁପାରିଶ କରାଯାଇଥିବା ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ସମୟ” ଫର୍ମକୁ ଅନୁସରଣ କରନ୍ତୁ |ଚିକିତ୍ସାର ଅବଧି
4. ଅଲ ern କିକ ସଂଗ୍ରହ
30 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ 12,000 rpm ରେ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗ୍ ଏବଂ ଅଲ ern କିକ ଶକ୍ତି ସଂଗ୍ରହ କରନ୍ତୁ |
ଟିପନ୍ତୁ: ଯଦି ସମାଧାନ ଅମ୍ଳୀୟ କିମ୍ବା କ୍ଷାରୀୟ, କିମ୍ବା ଲୁଣ, ଡିଟରଜେଣ୍ଟସ୍ କିମ୍ବା ଅଧିକ ମାତ୍ରାରେ ଥାଏ |denaturants, ଦୟାକରି ଏନଜାଇମର ମାତ୍ରା ବ increase ାନ୍ତୁ କିମ୍ବା ସେହି ଅନୁଯାୟୀ ଚିକିତ୍ସା ସମୟ ବ extend ାନ୍ତୁ |
ପରାମର୍ଶିତ ପ୍ରତିକ୍ରିୟାଅନସ୍
| ପାରାମିଟର | ସର୍ବୋତ୍କୃଷ୍ଟ ଅବସ୍ଥା | | ପ୍ରଭାବଶାଳୀ କଣ୍ଡିଟିଅର୍ | |
| Mg² + ଏକାଗ୍ରତା | | 1-5 ମି | 1-10 ମି |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| ତାପମାତ୍ରା | 37 ℃ | 0-42 ℃ |
| DTT ଏକାଗ୍ରତା | | 0-100 ମି | > 0 ମି |
| ମର୍କାପ୍ଟୋଥାନୋଲ୍ ଏକାଗ୍ରତା | | 0-100 ମି | > 0 ମି |
| ମୋନୋଭାଲାଣ୍ଟ କେସନ୍ ଏକାଗ୍ରତା | | 0-20 ମି | 0-150 ମି |
| ଫସଫେଟ୍ ଲୋନ୍ ଏକାଗ୍ରତା | | 0-10 ମି | 0-100 ମି |
ପରାମର୍ଶିତ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ସମୟ (37 ℃, 2) mM Mg² +, pH 8.0)
| ଅଲଟ୍ରା ନ୍ୟୁକ୍ଲିଜ୍ ରାଶି (ଅନ୍ତିମ ଏକାଗ୍ରତା) | ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ସମୟ | |
| 0.25 U / mL | > 10 ଘ |
| 2.5 U / mL | > 4 ଘ |
| 25 U / mL | 30 ମିନିଟ୍ |
ଟିପ୍ପଣୀ:
ଆପଣଙ୍କର ସ୍ୱାସ୍ଥ୍ୟ ଏବଂ ନିରାପତ୍ତା ନିଶ୍ଚିତ କରିବାକୁ ଦୟାକରି ଆବଶ୍ୟକ PPE, ଏହିପରି ଲ୍ୟାବ କୋଟ୍ ଏବଂ ଗ୍ଲୋଭସ୍ ପିନ୍ଧନ୍ତୁ!
