DNA ନିଷ୍କାସନ ମିନି କିଟ୍ |
ଏହି କିଟ୍ ଅପ୍ଟିମାଇଜଡ୍ ବଫର୍ ସିଷ୍ଟମ୍ ଏବଂ ସିଲିକା ଜେଲ୍ ସ୍ତମ୍ଭ ବିଶୋଧନ ପ୍ରଯୁକ୍ତିକୁ ଗ୍ରହଣ କରେ, ଯାହା TAE କିମ୍ବା TBE ଅଗରୋଜ୍ ଜେଲର ବିଭିନ୍ନ ଘନତ୍ୱରୁ 70 ବିପି - 20 କେବି DNA ଖଣ୍ଡ ପୁନରୁଦ୍ଧାର କରିପାରିବ |ଡିଏନ୍ଏ ଆଡସର୍ପସନ୍ ସ୍ତମ୍ଭ ଉଚ୍ଚ ଲୁଣ ଅବସ୍ଥାରେ DNA କୁ ସ୍ୱତନ୍ତ୍ର ଭାବରେ ଆଡର୍ସପ୍ କରିପାରେ |ଏଥିସହ, କିଟ୍ ସିଧାସଳଖ PCR ଉତ୍ପାଦ, ଏନଜାଇମାଟିକ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ କିମ୍ବା ଅନ୍ୟ ପଦ୍ଧତି ଦ୍ obtained ାରା ପ୍ରାପ୍ତ ଅଶୋଧିତ DNA ଉତ୍ପାଦରୁ DNA ଖଣ୍ଡଗୁଡ଼ିକୁ ଶୁଦ୍ଧ କରିପାରିବ ଏବଂ ପ୍ରୋଟିନ୍, ଅନ୍ୟାନ୍ୟ ଜ organic ବ ଯ ounds ଗିକ, ଅଜ ic ବିକ ଲୁଣ ଆୟନ ଏବଂ ଅଲିଗ୍ନୁକ୍ଲାଏଟାଇଡ୍ ପ୍ରାଇମର୍ ପରି ଅପରିଷ୍କାର ପଦାର୍ଥକୁ ବାହାର କରିପାରିବ |ଏହା ନିଶ୍ଚିତ କରିପାରିବ ଯେ 10-15 ମିନିଟ୍ ମଧ୍ୟରେ ଶୁଦ୍ଧତା ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ହୋଇପାରିବ |ଶୁଦ୍ଧ ଡିଏନ୍ଏ ସିଧାସଳଖ ଲିଗେସନ୍, ଟ୍ରାନ୍ସଫର୍ମେସନ୍, ଏନଜାଇମ୍ ହଜମ, ଭିଟ୍ରୋ ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍, PCR, କ୍ରମ, ମାଇକ୍ରୋ ଇଞ୍ଜେକ୍ସନ୍ ଇତ୍ୟାଦି ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇପାରିବ |
ସଂରକ୍ଷଣ ଅବସ୍ଥା
-15 ~ -25 at ରେ ଗଚ୍ଛିତ କରନ୍ତୁ ଏବଂ କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରାରେ ପରିବହନ କରନ୍ତୁ |
ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକ |
| ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକ | | (100 rxns) |
| ବଫର୍ ଜିଡିପି | | 80 ମି.ଲି. |
| ବଫର୍ GW | | 2 × 20 ମି.ଲି. |
| ଏଲିଟେସନ୍ ବଫର୍ | | 20 ମି.ଲି. |
| ଫାଷ୍ଟପୁର DNA ମିନି ସ୍ତମ୍ଭ-ଜି | | 100 |
ବଫର୍ ଜିଡିପି:DNA ବନ୍ଧନ ବଫର୍ |
ବଫର୍ GW:ଧୋଇବା ବଫର୍;ବ୍ୟବହାର ପୂର୍ବରୁ ବୋତଲରେ ସୂଚିତ ପରିମାଣ ଦ୍ୱାରା ସଂପୂର୍ଣ୍ଣ ଇଥାନଲ ଯୋଗ କରନ୍ତୁ |
ଏଲିଟେସନ୍ ବଫର୍:ବିଲୋପ
ଫାଷ୍ଟପୁର DNA ମିନି ସ୍ତମ୍ଭ- G:DNA ଆଡସର୍ପସନ୍ ସ୍ତମ୍ଭ |
ସଂଗ୍ରହ ଟ୍ୟୁବ୍ 2 ମିଲି:ଫିଲ୍ଟରେଟ୍ ପାଇଁ ସଂଗ୍ରହ ଟ୍ୟୁବ୍ |
ପ୍ରସ୍ତୁତ ସାମଗ୍ରୀ |
1.5 ମିଲି ଷ୍ଟେରିଲାଇଜଡ୍ ଟ୍ୟୁବ୍, ସଂପୂର୍ଣ୍ଣ ଇଥାନଲ୍ ଏବଂ ଆଇସୋପ୍ରୋପାନୋଲ୍ (ଯେତେବେଳେ DNA ଖଣ୍ଡ ≤100 ବିପି, 1 ଭଲ୍ୟୁମ୍ ଯୋଗ କରନ୍ତୁ |
ଆଇସୋପ୍ରୋପାନୋଲ୍ ରୁ 1 ଭଲ୍ୟୁମ୍ ଜେଲ୍), ପାଣି ସ୍ନାନ |
ପରୀକ୍ଷଣ ପ୍ରକ୍ରିୟା |
ବ୍ୟବହାର ପୂର୍ବରୁ ଟ୍ୟାଗରେ ସୂଚିତ ହୋଇଥିବା ପରି ବଫର୍ GW କୁ ମିଶ୍ରିତ କରିବା ପାଇଁ 80 ମିଲି ଇଥାନଲ୍ ମିଶାନ୍ତୁ, କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରାରେ ରଖନ୍ତୁ |
ଯାନ୍ତ୍ରିକତା
1. PCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ସମାଧାନ |
ଜେଲ୍ ନିଷ୍କାସନ ଯୋଜନା: ସମାନ ଭଲ୍ୟୁମ୍ ବଫର୍ ଜିଡିପି PCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ସମାଧାନ ପୁନରୁଦ୍ଧାର ଯୋଜନା ଯୋଗ କରନ୍ତୁ:ଭଲ୍ୟୁମ୍ ବଫର୍ 5 ଗୁଣ ଯୋଗ କରନ୍ତୁ |
2. ଜିଡିପି ଜେଲର ପରିମାଣ ଗଣନା କରନ୍ତୁ (100) | μl 100 ମିଗ୍ରା ସହିତ ସମାନ)
ଜେଲ୍ ବିସର୍ଜନ କରନ୍ତୁ |
3. 50 ~ 55 ରେ ଗରମ କରନ୍ତୁ |℃
4. ଧୋଇ ଧୋଇଦିଅ |
ବଫର୍ ଜିଡିପିର 300 μL ଯୋଡନ୍ତୁ *
ବଫର୍ GW ର 700 μL ଯୋଡନ୍ତୁ |
ବଫର୍ GW ର 700 μL ଯୋଡନ୍ତୁ |
5. Elute
20 - 30μL Elution ବଫର୍ କିମ୍ବା ଡିଓନାଇଜଡ୍ ପାଣି ମିଶାନ୍ତୁ |
ଟିପ୍ପଣୀ * ଏହି ପଦକ୍ଷେପ ବିନା PCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ତରଳ ପୁନରୁଦ୍ଧାର |
ଜେଲ୍ ନିଷ୍କାସନ କାର୍ଯ୍ୟକ୍ରମ |
1. ଡିଏନ୍ଏ ଖଣ୍ଡଗୁଡ଼ିକୁ ଭଗ୍ନାଂଶ କରିବା ପାଇଁ DNA ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରେସିସ୍ ପରେ, UV ଆଲୋକ ତଳେ ଅଗରୋଜ ଜେଲରୁ DNA ଖଣ୍ଡର ଏକକ ଷ୍ଟ୍ରାଇପ୍ ଏକ୍ସାଇଜ୍ କରନ୍ତୁ |ଜେଲର ସ୍ପଷ୍ଟ ଆର୍ଦ୍ରତା ଅବଶୋଷଣ କରିବା ଏବଂ ଯଥା ସମ୍ଭବ ଅତିରିକ୍ତ ଆଗରୋଜ୍ ଅପସାରଣ କରି ଜେଲ୍ ସ୍ଲାଇସର ଆକାରକୁ କମ୍ କରିବା ପାଇଁ ଶୋଷକ କାଗଜ ବ୍ୟବହାର କରିବାକୁ ପରାମର୍ଶ ଦିଆଯାଇଛି |ଏହାର ପରିମାଣ ଗଣନା କରିବା ପାଇଁ ଜେଲ୍ ସ୍ଲାଇସ୍ (ମାଇକ୍ରୋସେଣ୍ଟ୍ରିଫ୍ୟୁଜ୍ ଟ୍ୟୁବ୍ ବିନା) ଓଜନ କରନ୍ତୁ: ଘନତା 1g / ml ବୋଲି ମନେକରି 100 ମିଗ୍ରା ଜେଲ୍ଲାଇସର ପରିମାଣ ପ୍ରାୟ 100 μL ଅଟେ |
2. ସମାନ ଭଲ୍ୟୁମ୍ ବଫର୍ ଜିଡିପି ଯୋଡନ୍ତୁ, 7-10 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ 50 ~ 55 at ରେ ଇନକ୍ୟୁବେଟ୍ କରନ୍ତୁ (ଜେଲ୍ ଆକାର ଅନୁଯାୟୀ, ଜେଲ୍ ସଂପୂର୍ଣ୍ଣଭାବେ ତରଳି ଯିବା ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ଇନକ୍ୟୁବେସନ ସମୟ ଆଡଜଷ୍ଟ କରନ୍ତୁ) |ଇନକ୍ୟୁବେସନ ସମୟରେ 2 ଥର ଟ୍ୟୁବକୁ ଓଲଟାନ୍ତୁ |
Buff ବଫର୍ ଜିଡିପିର 1-3 ଭଲ୍ୟୁମ୍ ଯୋଗ କରିବା ଦ୍ୱାରା DNA ପୁନରୁଦ୍ଧାର ଦକ୍ଷତା ପ୍ରଭାବିତ ହେବ ନାହିଁ |ଯଦି ପୁନରୁଦ୍ଧାର ହେବାକୁ ଥିବା DNA ଖଣ୍ଡ <100 bp, 3 ଭଲ୍ୟୁମ୍ ବଫର୍ ଜିଡିପି ଯୋଡାଯିବା ଆବଶ୍ୟକ;ଯେତେବେଳେ ଜେଲ୍ ସ୍ଲାଇସ୍ ସଂପୂର୍ଣ୍ଣ ଭାବେ ତରଳି ଯାଇଛି, 1 ଭଲ୍ୟୁମ୍ ଆଇସୋପ୍ରୋପାନୋଲ୍ ମିଶାନ୍ତୁ ଏବଂ ଭଲ ଭାବରେ ମିଶାନ୍ତୁ, ତାପରେ ପରବର୍ତ୍ତୀ ପଦକ୍ଷେପକୁ ଜାରି ରଖନ୍ତୁ |
3. ନମୁନାକୁ ଟ୍ୟୁବ୍ ତଳେ ଆଣିବା ପାଇଁ ସଂକ୍ଷେପରେ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗ୍, ଫାଷ୍ଟପୁର DNA ମିନି କଲମ୍ସ-ଜି ସଂଗ୍ରହ ଟ୍ୟୁବରେ 2 ମିଲି ଭର୍ତ୍ତି କର, ସମାଧାନକୁ ଯତ୍ନର ସହିତ ସର୍ବାଧିକ 700 μL ଥରେ ସ୍ଥାନାନ୍ତର କର |
ଫିଲ୍ଟରେସନ୍ ସ୍ତମ୍ଭଗୁଡ଼ିକର ସମୟ, 30-60 ସେକେଣ୍ଡ ପାଇଁ 12,000 rpm (13,800 X g) ରେ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗ୍ |
4. ଫିଲ୍ଟ୍ରେଟ୍କୁ ପରିତ୍ୟାଗ କରନ୍ତୁ ଏବଂ ସ୍ତମ୍ଭରେ 300 μL ବଫର୍ ଜିଡିପି ଯୋଗ କରନ୍ତୁ, ରୁମ୍ ତାପମାତ୍ରାରେ 1 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ଇନ୍କ୍ୟୁବେଟ୍ କରନ୍ତୁ, 12,000 rpm (13,800 X g) ରେ 30-60 ସେକେଣ୍ଡ୍ ପାଇଁ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗ୍ |
5. ଫିଲ୍ଟ୍ରେଟ୍କୁ ପରିତ୍ୟାଗ କରନ୍ତୁ ଏବଂ ସ୍ତମ୍ଭରେ 700 μL ବଫର୍ GW ଯୋଗ କରନ୍ତୁ (ସଂପୂର୍ଣ୍ଣ ଇଥାନଲ୍ ଆଗରୁ ଯୋଗ କରାଯାଇଛି କି ନାହିଁ ଯାଞ୍ଚ କରନ୍ତୁ!), 30-60 ସେକେଣ୍ଡ ପାଇଁ 12,000 rpm (13,800 X g) ରେ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗ୍ |
Δ ଦୟାକରି ଆଡସର୍ପସନ୍ ସ୍ତମ୍ଭ କାନ୍ଥରେ ବଫର୍ GW ଯୋଡନ୍ତୁ, କିମ୍ବା ବଫର୍ GW ବ୍ୟାକ୍ କଭର ଯୋଗ କରନ୍ତୁ ଏବଂ ଟ୍ୟୁବ୍ କାନ୍ଥରେ ଲାଗିଥିବା ଲୁଣକୁ ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ରୂପେ ଫ୍ଲାଶ୍ କରିବାରେ ସାହାଯ୍ୟ କରିବା ପାଇଁ ବଫର୍ GW ବ୍ୟାକ୍ କଭର ଯୋଗ କରନ୍ତୁ ଏବଂ ଏହାକୁ 2 - 3 ଥର ଓଲଟା କରି ମିଶାନ୍ତୁ |
6. ପଦାଙ୍କ 5 ପୁନରାବୃତ୍ତି କରନ୍ତୁ |
Buff ବଫର୍ GW ସହିତ ଦୁଇଥର ଫ୍ଲାଶ୍ କରିବା ନିଶ୍ଚିତ କରେ ଯେ ଲୁଣ ସଂପୂର୍ଣ୍ଣ ରୂପେ କା removed ି ଦିଆଯାଏ ଏବଂ ପରବର୍ତ୍ତୀ ପରୀକ୍ଷଣ ଉପରେ ଏହାର ପ୍ରଭାବକୁ ଦୂର କରେ |
7. 2 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ 12,000 rpm (13,800 X g) ରେ ଖାଲି ସ୍ତମ୍ଭକୁ ଫିଲ୍ଟରେଟ୍ ଏବଂ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗ୍ ପରିତ୍ୟାଗ କରନ୍ତୁ |
8. ଏକ ପରିଷ୍କାର 1.5 ମିଲି ମାଇକ୍ରୋସେଣ୍ଟ୍ରିଫ୍ୟୁଜ୍ ଟ୍ୟୁବରେ ସ୍ତମ୍ଭ ଭର୍ତ୍ତି କରନ୍ତୁ, ସ୍ତମ୍ଭ ମେମ୍ବ୍ରାନ୍ର ମଧ୍ୟଭାଗରେ 20 - 30 μL ଏଲ୍ୟୁସନ୍ ବଫର୍ ମିଶାନ୍ତୁ, 2 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ଇନ୍କ୍ୟୁବେଟ୍ କରନ୍ତୁ, ଏବଂ ପରେ 12,000 rpm (13,800 X g) ରେ 1 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗ୍ |ସ୍ତମ୍ଭକୁ ପରିତ୍ୟାଗ କରନ୍ତୁ, ପ୍ରାପ୍ତ DNA କୁ -20 ରେ ସଂରକ୍ଷଣ କରନ୍ତୁ |
Step ପୁନର୍ବାର ଷ୍ଟେପ୍ 8 ର ଅଲ ern କିକ ସ୍ତମ୍ଭକୁ ସ୍ତମ୍ଭକୁ ସ୍ଥାନାନ୍ତର କରିବା ଏବଂ ଏଲ୍ୟୁସନ୍ ବଫର୍ କୁ 55 କୁ ଗରମ କରିବା (ଯେତେବେଳେ DNA ଖଣ୍ଡ> 3 kb) ପୁନରୁଦ୍ଧାର ଦକ୍ଷତା ବୃଦ୍ଧି ପାଇଁ ସହାୟକ ହୋଇପାରେ |
PCR ଉତ୍ପାଦ ପୁନରୁଦ୍ଧାର ପ୍ରୋଗ୍ରାମ |
PCR ପ୍ରଡକ୍ଟ, ଏନଜାଇମାଟିକ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ ଏବଂ ଅନ୍ୟାନ୍ୟ DNA ଅଶୋଧିତ ଦ୍ରବ୍ୟ (ଜେନେଟିକ୍ DNA ଅନ୍ତର୍ଭୂକ୍ତ କରି) ରୁ DNA ଖଣ୍ଡଗୁଡ଼ିକୁ ଶୁଦ୍ଧ କରିବା ପାଇଁ ଏହି ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ ପ୍ରଯୁଜ୍ୟ |ଏହି ସମାଧାନ ବିଭିନ୍ନ ନ୍ୟୁକ୍ଲିଓଟାଇଡ୍, ପ୍ରାଇମର୍, ପ୍ରାଇମର୍ ଡାଇମର୍, ଲୁଣ ଅଣୁ, ଏନଜାଇମ୍ ଏବଂ ଅନ୍ୟାନ୍ୟ ଅପରିଷ୍କାରତାକୁ ଦକ୍ଷତାର ସହିତ ଅପସାରଣ କରିପାରିବ |
1. ସଂକ୍ଷେପରେ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗ୍ PCR ଉତ୍ପାଦ, ଏନଜାଇମାଟିକ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ସମାଧାନ ଏବଂ ଅନ୍ୟାନ୍ୟ DNA ଅଶୋଧିତ ଦ୍ରବ୍ୟ |ପାଇପେଟ୍ ସହିତ ସେମାନଙ୍କର ପରିମାଣ ଆକଳନ କର ଏବଂ ଏକ ନିର୍ଗତ 1.5 ମିଲି କିମ୍ବା 2 ମିଲି ଟ୍ୟୁବ୍ କୁ ସ୍ଥାନାନ୍ତର କର |100 μL ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ଭଲ୍ୟୁମ୍ ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ddH2O ଯୋଡନ୍ତୁ;ଉଚ୍ଚ ସଙ୍କୋଚନ ସହିତ ଜେନୋମିକ୍ DNA ପାଇଁ, ddH2O ସହିତ 300 μL କୁ ହ୍ରାସ କରିବା ପୁନରୁଦ୍ଧାର ଦକ୍ଷତାକୁ ଉନ୍ନତ କରିବାରେ ସାହାଯ୍ୟ କରିବ |
2. ବଫର୍ ଜିଡିପିର 5 ଭଲ୍ୟୁମ୍ ଯୋଡନ୍ତୁ, ଓଲଟା କିମ୍ବା ଭର୍ଟେକ୍ସିଂ ଦ୍ୱାରା ଭଲ ଭାବରେ ମିଶାନ୍ତୁ |ଯଦି ଆଗ୍ରହର DNA ଖଣ୍ଡ> 100 ବିପି, ଇଥାନଲର ଅତିରିକ୍ତ 1.5 ଭଲ୍ୟୁମ୍ (ନମୁନା + ବଫର୍ ଜିଡିପି) ଯୋଡିବା ଆବଶ୍ୟକ |
3. ସ୍ତମ୍ଭକୁ ପୁନର୍ବାର ସଂଗ୍ରହ ଟ୍ୟୁବରେ ଭର୍ତ୍ତି କର, ମିକ୍ସଟ୍ରୁ ସ୍ତମ୍ଭକୁ ସ୍ଥାନାନ୍ତର କର, ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗ୍ 12,000 rpm (13,800 × g) ରେ 30 - 60 ସେକେଣ୍ଡ ପାଇଁ |ଯଦି ମିଶ୍ରିତ ସମାଧାନର ପରିମାଣ> 700 µL ଅଟେ, ତେବେ ଆଡସର୍ପସନ୍ ସ୍ତମ୍ଭକୁ ସଂଗ୍ରହ ଟ୍ୟୁବରେ ରଖନ୍ତୁ, ଅବଶିଷ୍ଟ ସମାଧାନକୁ ଆଡସର୍ପସନ୍ ସ୍ତମ୍ଭକୁ ସ୍ଥାନାନ୍ତର କରନ୍ତୁ ଏବଂ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗ୍ 12,000 rpm (13,800 × g) ରେ 30 - 60 ସେକେଣ୍ଡ ପାଇଁ |
4. ପରବର୍ତ୍ତୀ କାର୍ଯ୍ୟଦକ୍ଷତା 08- 1 / ଜେଲ୍ ନିଷ୍କାସନ ପ୍ରୋଗ୍ରାମର ଷ୍ଟେପ୍ 5 - 8 କୁ ସୂଚିତ କରେ |
ପ୍ରୟୋଗଗୁଡ଼ିକ
TAE କିମ୍ବା TBE ଅଗରୋଜ ଜେଲର ବିଭିନ୍ନ ଏକାଗ୍ରତା;ବିଭିନ୍ନ ପଦ୍ଧତି ଦ୍ obtained ାରା ପ୍ରାପ୍ତ PCR ଉତ୍ପାଦ, ଏନଜାଇମାଟିକ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ କିମ୍ବା ଅନ୍ୟାନ୍ୟ ଅଶୋଧିତ DNA ଉତ୍ପାଦ |ପୁନରୁଦ୍ଧାର ହୋଇଥିବା ଖଣ୍ଡଗୁଡ଼ିକ ଠାରୁ ଆରମ୍ଭ କରି |70 bp -20 kb।
ଟିପ୍ପଣୀ |
ଅନୁସନ୍ଧାନ ପାଇଁ କେବଳ ବ୍ୟବହାର ପାଇଁ |ଡାଇଗ୍ନୋଷ୍ଟିକ୍ ପ୍ରଣାଳୀରେ ବ୍ୟବହାର ପାଇଁ ନୁହେଁ |
1. ବଫର୍ GW କୁ ମିଶ୍ରିତ କରିବା ପାଇଁ 80 ମିଲି ଇଥାନଲ୍ ମିଶାନ୍ତୁ, ବ୍ୟବହାର ପୂର୍ବରୁ ଟ୍ୟାଗରେ ସୂଚିତ, ରୁମ୍ ତାପମାତ୍ରାରେ ସଂରକ୍ଷଣ କରନ୍ତୁ |
2. ଯଦି କମ୍ ତାପମାତ୍ରା ସଂରକ୍ଷଣ ସମୟରେ ବଫର୍ ଜିଡିପି ସହଜ ହୋଇପାରେ, ଏହାକୁ ବ୍ୟବହାର ପୂର୍ବରୁ କିଛି ସମୟ ପାଇଁ କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରାରେ ରଖାଯାଇପାରିବ |ଯଦି ଆବଶ୍ୟକ ହୁଏ, ତେବେ ଏହାକୁ 37 ℃ ପାଣି ସ୍ନାନରେ ଗରମ କରାଯାଇପାରେ ଯେପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ବୃଷ୍ଟିପାତ ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ରୂପେ ନଷ୍ଟ ହୋଇଯାଏ, ଏବଂ ପରେ ଏହାକୁ ମିଶ୍ରଣ ପରେ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରେ |
3. ଜଳ ସ୍ନାନର ତାପମାତ୍ରାକୁ 50 ~ 55 to ପୂର୍ବରୁ ସେଟ୍ କରନ୍ତୁ |
4. 08-1 / ଜେଲ୍ ନିଷ୍କାସନ ପ୍ରୋଗ୍ରାମ ଷ୍ଟେପ୍ 1 ରେ, ଜେଲ୍ ସ୍ଲାଇସର ଆକାରକୁ କମ୍ କରିବା ଦ୍ ol ାରା ଦ୍ରବଣ ସମୟ ଯଥେଷ୍ଟ ହ୍ରାସ ପାଇବ ଏବଂ ପୁନରୁଦ୍ଧାର ଦକ୍ଷତା ବୃଦ୍ଧି ପାଇବ (ଉଚ୍ଚ ତାପମାତ୍ରାରେ କ୍ରମାଗତ ଭାବରେ ଉନ୍ମୁକ୍ତ ହେଲେ ଲାଇନ୍ରେଜଡ୍ DNA ସହଜରେ ହାଇଡ୍ରୋଲାଇଜ୍ ହୋଇପାରେ) |ଦୀର୍ଘ ସମୟ ଧରି UV ରେ DNA ଜେଲ୍ ଏକ୍ସପୋଜର୍ କରନ୍ତୁ ନାହିଁ, କାରଣ ଅତିବାଇଗଣି ରଙ୍ଗର ଆଲୋକ DNA କ୍ଷତି କରିପାରେ |
5. 08- 1 / ଜେଲ୍ ନିଷ୍କାସନ ପ୍ରୋଗ୍ରାମ ଷ୍ଟେପ୍ 2 ରେ ଜେଲ୍କୁ ବିସର୍ଜନ କରନ୍ତୁ, ନଚେତ୍ DNA ପୁନରୁଦ୍ଧାର ଦକ୍ଷତା ଗୁରୁତର ଭାବରେ ପ୍ରଭାବିତ ହେବ |
6. ଏଲ୍ୟୁସନ୍ ବଫର୍ କିମ୍ବା ddH2O ରୁ 55 କୁ ଗ୍ରୀଟ୍ କରନ୍ତୁ, ଯାହା DNA ବିସ୍ତାର ଦକ୍ଷତାକୁ ଉନ୍ନତ କରିବାରେ ସାହାଯ୍ୟ କରେ |2.5 mM Tris-HCl, pH 7.0 - 8.5 ର ଡିଏନ୍ଏ ସଂରକ୍ଷଣ କରିବାକୁ ପରାମର୍ଶ ଦିଆଯାଇଛି |
